统计学分析：实验数据在Windows XP操作系统下采用SPSS 11.5软件处理。采用多个样本比较的秩和检验；两独立样本的Wilcoxon秩和检验。
2结果
2.1大鼠眼压 大鼠眼压正常为7～20（平均12.62±0.28）mmHg。每只大鼠左右眼眼压基本对称，差异无统计学意义。损伤组I和损伤组II大鼠激光处理1h后眼压明显上升（12.67±3.26 vs12.50±3.00mmHg，P>0.05）。损伤组I大鼠激光处理1wk后眼压稍有下降，之后趋于平稳，维持在约40mmHg；正常对照组在激光处理后无明显改变(图1）。
2.2 SD大鼠RGCL中EPOR，AKT，PAKT的表达 正常对照组SD大鼠RGCL中EPOR表达呈阳性，且EPOR表达在视网膜内核层也呈阳性（图2A）。激光处理8wk后，各组RGCL中EPOR表达较正常对照组明显增强，其平均光密度值较正常对照组差异具有统计学意义(P<0.05，表1，图2B）。慢性高眼压持续8wk后：损伤组和DMSO组RGCL中AKT与PAKT表达较正常对照组无明显变化；rHuEPO治疗组RGCL中AKT表达也较正常对照组无明显变化；但rHuEPO治疗组RGCL中PAKT表达较正常对照组增加(P<0.05)，且其增加可被激活AKT磷酸化的上游因子PI3激酶的抑制剂WM阻断，即rHuEPO+WM组RGCL中PAKT表达较rHuEPO组减少(P<0.05，表1，图2C）。
表2 各组RGCL中EPOR，AKT，PAKT表达吸光度的改变，凋亡细胞数（略）
图2 大鼠视网膜中EPOR，PAKT的表达（×400）（略）
A：正常大鼠EPOR；B：损伤后EPOR；C：rHuEPO组PAKT
2.3 SD大鼠视网膜神经细胞凋亡数目的变化 正常对照组SD大鼠RGCL中偶见凋亡神经细胞，几乎没有表达。但慢性高眼压持续8wk后：损伤组RGCL中凋亡神经细胞数较正常对照组增加(P<0.05)；rHuEPO治疗组RGCL中凋亡神经细胞数较损伤组减少 (P<0.05)；rHuEPO+WM组RGCL中凋亡神经细胞数较rHuEPO组增多(P<0.05，表1，图3）。
3讨论
3.1慢性高眼压对EPOR表达的影响 rHuEPO具有和天然EPO相同的生物学活性[5]，传统认为EPO只作用于造血系统，EPOR也仅存在于红系前体细胞。但大量研究[24]表明，在人类和动物模型的许多器官、组织和细胞中都有功能性EPOR存在，这些非造血细胞包括内皮细胞、肠上皮细胞、肌肉组织、以及神经系统中神经元和非神经元细胞。
图3 TUNEL检测免疫荧光图片 （略）
A:正常对照组;B: 损伤组I;C:rHuEPO组;D:rHuEPO+WM组
1998年，Juul等[5]研究发现人的胚胎视网膜存在EPOR表达。从此，EPO和EPOR表达于视网膜以及其对视神经的保护引起学者的广泛关注。Yamasaki等[6]利用逆转录聚合酶链反应技术在体外培养的视网膜神经节细胞中检测到EPO及EPOR的mRNA。Bocker等[7]利用免疫组织化学技术在正常SD大鼠视网膜和缺血后视网膜内核层、外核层和神经节细胞层都发现有EPOR表达。Xie等[8]发现在视网膜脱离病变中，视网膜各层均可检测到EPO和EPOR表达。我们也利用免疫组织化学技术在正常SD大鼠视网膜神经节细胞层检测到EPOR表达，还在视网膜内核层发现有EPOR表达。Inomata等[9]发现在增生型糖尿病性视网膜病变和视网膜分支静脉阻塞等缺血性视网膜病变中，玻璃体内的EPO浓度大量增加，认为缺血缺氧是刺激EPO生成的可能诱因。我们的研究表明：损伤组RGCL中EPOR表达较正常对照组明显增加，且在玻璃体内注射rHuEPO或联合注射rHuEPO和WM后EPOR的增加仍无明显改变。因此我们认为慢性高眼压模型中持续8wk的高眼压对视网膜是一个长期缺血缺氧的刺激，使EPOR的表达持续增加，且外源性rHuEPO不会导致EPOR表达的减少。
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