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　　线粒体氧化应激在体外视网膜色素上皮细胞凋亡中的作用及干预研究

　　唐敏 樊莹

　　上海交通大学附属第一人民医院 眼科 200080

　　目的 利用过氧化氢（H2O2）诱导体外视网膜色素上皮（retinal pigment epithilial ,RPE）细胞凋亡模型，检测细胞线粒体DNA（mtDNA）的损伤和线粒体通透性转运孔（MPTP）状态，分析它们与细胞凋亡的相关性；并观察褪黑激素（MLT）对于线粒体的保护作用及其对细胞凋亡的影响。

　　方法 实验以培养的人视网膜色素上皮细胞株为研究对象，给予不同浓度和时间的过氧化氢（H2O2）刺激，以建立体外培养的RPE细胞凋亡模型。通过线粒体DNA缺失片段及保留片段的扩增检测线粒体DNA完整性，通过检测线粒体中细胞色素C的释放反映线粒体通透性转运孔状态改变，并分析它们与细胞凋亡的相关性；分别给予不同浓度和时间的MLT干预，检测以上指标的变化。

　　结果 随着H2O2诱导细胞凋亡的加剧，线粒体DNA完整性相应下降，线粒体细胞色素C释放增加，两者与细胞凋亡的程度显著相关。利用褪黑激素干预，明显减轻了线粒体DNA的破坏及细胞色素C的释放，也减少了最终细胞凋亡的发生，差异具显著性（Ｐ<0.05）。

　　结论　在细胞凋亡的过程中线粒体的功能变化起到了重要作用，细胞mtDNA的损伤和MPTP状态改变与细胞凋亡保持高度的相关性；褪黑激素通过线粒体的抗氧化保护作用有效减轻了细胞凋亡的发生。

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