基础 2160 PO0144
α晶体蛋白对体外培养RGCs作用实验研究
王晓芹,王一
第三军医大学西南眼科医院 400038
目的 探讨α晶体蛋白对体外培养视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)的作用及机制。
方法 原代培养Long Evans大鼠RGCs,Thy1.1抗原鉴定RGCs并进行纯度检测,培养2d后加入10-7、10-6、10-5、10-4g/Lα晶体蛋白加入后1、3、12h、1、2d和3d在相差显微镜下观察RGCs形态学变化;计轴突长度和突起数目;应用免疫荧光法及激光共聚焦扫描技术观察а晶体蛋白在体外培养RGCs上的定位并进行荧光强度半定量分析。
结果 Thy1.1鉴定RGCs纯度为90%~95%,RGCs10-4g/L、10-5g/L组轴突数目及长度显著大于对照组,以10-4g/L组变化最显著。免疫荧光结果见10-4g/Lα晶体蛋白组RGCs膜上有免疫复合物沉积,其荧光强度并呈先升高后降低趋势。 结论α晶体蛋白能够促进RGCs生长,最佳浓度为10-4g/Lα晶体蛋白可与RGCs细胞膜结合,这在α晶体蛋白促进RGCs存活和轴突再生的反应中可能起重要作用。
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