作者：詹峰 李金伟 何西奎 谭屹
【关键词】甲磺酸帕珠沙星;滴眼液;制备;质量控制
【Abstract】 Objective To prepare compound pazufloxacin mesilate eye drops and a to establish a method of it’s qualit control. Methods Compound pazufloxacin mesilate eye drops were parepared with pazufloxacin mesilate , sodium chloride , dexamethasone sodium phosphate , and ethylparaben . The content of moxifloxacin h drochloride was d etermined by HPLC. Results A linear calibration curve for assay of Pazufloxacin mesilate was obtained in the range of 20.0~80.0 μg/ml(r=0.999 9) and the average recoveries were 97.7% (RSD=1.96% n=6). Conclusion Formation technique is simple and quality can be controled，thus deserving to be popularized.
【Key words】Pazufloxacin mesilate; Eye drops;Preparation;Quality control
甲磺酸帕珠沙星(pazufloxacin mesilate)是日本富山化学工业株式会社研究开发的新一代氟喹诺酮类抗菌药,于2002年4月在日本首次上市[1]。该药在化学结构上作了重要的改变，将 C10上传统的C-N键改变成C-C键，临床表现出很高的安全性,体内外试验表明,甲磺酸帕珠沙星对革兰阴性菌的活性同其他氟喹诺酮类药物相当,而对革兰阳性菌的活行明显增强,尤其是对厌氧菌有较强的抗菌活性,且抗生素后效应时间长[2-3]。现开发有甲磺酸帕珠沙星注射液和粒剂，尚未见其他剂型。为拓宽其使用范围,笔者研制复方甲磺酸帕珠沙星滴眼液，并建立质量控制方法。
1 材料与方法
1.1 仪器 岛津LC-10AD型高效液相色谱仪，SPD-10A型紫外检测器，SCL-10A型控制器，C-RTA型色谱数据处理机。
1.2 试药 甲磺酸帕珠沙星原料（浙江司太立制药有限公司，批号：20061106），甲磺酸帕珠沙星对照品（含量99.9%，江苏亚邦医药有限公司提供）。地塞米松磷酸钠(天津药业有限公司，批号：011006)。氯化钠(江苏南通勤奋制药厂，批号：20030312)。 羟苯乙酯(广州气体厂有限公司，批号：20031001)。乙腈为色谱纯，其余均为分析纯。
1.3 处方 甲磺酸帕珠沙星3.0 g氯化钠8.5 g地塞米松磷酸钠0.15 g羟苯乙酯0.3 g注射用水加到1000 ml。
1.4 制备 取羟苯乙酯溶解于适量热注射用水中，依次加入氯化钠、地塞米松磷酸钠搅拌使溶解。添加适量注射用水，再加入甲磺酸帕珠沙星，搅拌使溶解。过滤，自滤器添加注射用水到1000 ml,混匀，100℃流通蒸汽灭菌30 min，放冷至室温，无菌分装即可。
1.5 质量控制
1.5.1 性状 本品为微黄色澄明液体。
1.5.2 鉴别 本品显有机氟化物的鉴别反应[4]。取本品含量测定项下溶液，在335 nm与249 nm波长处有最大吸收。
1.5.3 地塞米松磷酸钠[4]取本品1 ml，蒸干，加硫酸3 ml，振摇溶解，5 min内显淡红棕色，加水10 ml混匀，颜色消失。
1.5.4 检查 取本品，检测其pH值应为5.0～7.0。其他应符合2005年版《中国药典》（二部）附录眼用制剂项下的有关规定。
2 结果
2.1 含量测定
2.1.1 色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-［10%甲磺酸溶液-1.0 mol/L 磷酸氢二钾溶液-水（10∶7∶153）（用三乙胺调节pH值至3.0）］（30∶170）为流动相，流速2.0 ml/min，温度20℃～25℃，进样量为20 μl，测定波长范围200～500 nm，检测波长为249 nm。
2.1.2 溶液的制备 ①对照品溶液: 取干燥至恒重的甲磺酸帕珠沙星对照品，用流动相制成每毫升中含约40 μg的溶液，作为对照品溶液；②供试品溶液及空白溶液：精密量取甲磺酸帕珠沙星凝胶适量用流动相制成每毫升中含约40 μg的溶液，作为供试品溶液。同法制备不含甲磺酸帕珠沙星的空白溶液。
2.2 标准曲线 精密取干燥至恒重的甲磺酸帕珠沙星对照品适量，用流动相稀释至20.0、30.0、40.0、50.0、80.0 μg/ml，分别量取20 μl注入色谱仪记录色谱图，以浓度C为横坐标，峰面积X为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程X=50 691C-5 707，r=0.999 9，结果显示本品在20.0～80.0 μg/ml浓度范围内，线性关系良好。
2.3 检测波长 取对照品溶液，同时取按照处方量配制不含甲磺酸帕珠沙星（含地塞米松磷酸钠、氯化钠、羟苯乙酯）的空白溶液，在200～500 nm波长范围内扫描，甲磺酸帕珠沙星溶液在 249、335 nm 波长处有最大吸收, 因在249 nm 处吸收系数相对较大,而空白溶液在此波长处无吸收。在249 nm波长处，处方中的各组分对测定无干扰，故选定249 nm作为甲磺酸帕珠沙星溶液的检测波长。
2.4 精密度试验 取2.1.2项下对照品溶液1 d内0、4、8、12、16 h在2.2.1色谱条件下分别进样5次，结果日内RSD=0.63%。
2.5 溶液稳定型试验 取于室温条件下放置的对照品溶液，连续5 d进样检测，结果日间峰面积RSD=1.91%，未发现杂质峰。结果表明，甲磺酸帕珠沙星溶液在考察时间范围内基本稳定。
2.6 回收率试验 精密称取甲磺酸帕珠沙星对照品适量(30.5、29.3、39.7、41.1、50.6、51.3 mg) ,置50 ml容量瓶中，按处方比例加入空白全辅料,加流动相溶解、定容, 摇匀后吸取5 ml置于100 ml容量瓶中,加流动相溶解、定容。精密量取续滤液20 μl进样，测定含量，得平均回收率为98.53%，RSD=1.77%（n=6）,详见表1。
2.7 重现性试验 按样品含量测定方法，测定同一批样品（批号060418），结果含量平均值为96.9%，RSD=2.01%(n=6)。
2.8 样品含量测定 精密称取甲磺酸帕珠沙星滴眼液1 ml置于100 ml容量瓶中，加流动相溶解、定容,摇匀，精密量取续滤液20 μl注入色谱仪测定含量，经测定批号为051205、060129、0600312的样品，含量分别为标示量的97.1%、99.5%、96.7%。
2.9 稳定型试验 取本品包装完好，于室温避光条件下放置12mo的样品（批号为051205），观察其外观颜色无变化；参照含量测定项下，测定含量为标示量的96.8%。结果表明本品性质稳定。
2.10 刺激性试验 取体质量在2.0～3.0 kg健康家兔5只，2次/d分别于每只家兔一侧眼内滴入本品，另一侧同时滴入生理盐水做对照。记录给药后1、6、24、48、72 h和连续7 d的兔眼局部反应情况，无发红、充血现象。结果表明本制剂无刺激性，眼用安全。
3 讨论
甲磺酸帕珠沙星属第四代喹诺酮类抗菌药,其作用机制为DNA拓扑异构酶抑制剂，使细菌的DNA无法形成超螺旋结构,导致细菌无法分裂和增值而死亡[5]。体内、体外试验表明该药具有广谱抗菌性,对革兰阳性菌、革兰阴性菌均有效。对多种感染症状均有很高的疗效,尤其对呼吸道感染、外科手术感染如胆道感染、尿路感染和眼内感染疗效更佳,而在中枢神经系统方面的副作用较弱,本品的不良反应发生率与注射用头孢菌素类药物大致相同,因此在使用这些药物无效情况下,有望使用本品进行治疗[6]。本制剂使用的是帕珠沙星的甲磺酸盐，性质稳定，溶液呈弱酸性，不用加入其他物质调节，pH值就在合格范围之内。
复方甲磺酸帕珠沙星滴眼液采用甲磺酸帕珠沙星与糖皮质激素地塞米松磷酸钠配伍，可增强抗菌抗炎效果。主要用于敏感菌引起的眼睑炎、麦粒肿、泪囊炎、结膜炎、角膜炎、角膜溃疡及术后感染等。本制剂采用高效液相色谱法测定含量，检测结果准确，方法可靠。本制剂制备方法简单，生产周期短，一般制剂室都可生产。
参考文献
［1］ 李芹，闫志国，王睿.注射用甲磺酸帕珠沙星的药理作用与临床应用.世界临床药物，2005,26(1):36.
［2］ Johnson AP,Pazufloxacin Toyama Chemical Co.currpin investing J. Drugs,2001,1(1):52-57.
［3］ Yasuhit Kawamura, Nobuko kito, Akio nakahiro sanzen and Takuya Kama. Three months intravenous repeated dose toxicity study of T-3762in rats.The Japanese journal of antibiotics,1998,12:623.
［4］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典.化学工业出版社，2005：附录58.
［5］ 钟倩.抗菌药:甲磺酸帕珠沙星. 世界药物与临床,2004，25（2）：122-123.
［6］ 张晶, 薛爱芳, 糜志远,等.紫外分光光度法测定甲磺酸帕珠沙星原料药含量.光谱实验室,2006,23(5):931 |
