作者:郑洁珍 周大兴 彭少华 朱晓燕 顾静 王晶
【关键词】 白内障;D半乳糖;超氧化物歧化酶;过氧化氢酶;丙二醛;谷胱苷肽过氧化酶
Abstract: [Objective]To discuss mechanism of FS1272 eye drops on cataract of rats induced by Dgalactose. [Method]By using the model of cataract of rats induced by Dgalactose to determine the content of SOD,CAT,GSHpx,MDA in lens.
[Result]FS1272 eye drops can increase the activities of SOD,CAT,GSHpx and decrease the content of MDA. [Conclusion]FS1272 eye drops have the effect of delaying the generation and development of cataract by alleviating the extent of oxidative injury of lens.
Key words: cataract;Dgalactose;SOD;MDA;CAT;GSHpx 老年性白内障(senile cataract,SC)是一种发病率、致盲率均居于当今国内外眼病之首的老年性疾病[1]。在老年性白内障发病机制的研究中,氧化损伤机制已得到眼科学术界的公认。本实验采用D半乳糖性白内障模型来模拟老年性白内障,测定大鼠晶状体中SOD、CAT、GSHpx等抗氧化酶活性及氧化产物MDA的含量。现将结果报告如下。
1 材料
1.1 动物 健康Wistar大鼠84只,体重60~80g,雌雄各半,由浙江中医药大学实验动物中心提供。
1.2 药品与试剂 FS-1272滴眼液,(多肽类物质)上海新药开发中心,批号:050420;白内停滴眼液(吡诺克辛钠滴眼液),武汉五景药业有限公司,批号:05040204;莎普爱思(苄达赖氨酸滴眼液),浙江平湖莎普爱思制药有限公司,批号:050419;1%阿托品滴眼液,杭州市一医院制剂,批号:050125;D半乳糖液,上海恒信化学试剂有限公司,批号:030926;MDA、SOD、GSHpx、CAT试剂,南京建成生物工程研究所,批号分别为:20050716,20050602,20050719,20050725。
1.3 主要仪器 UNIVERSAL320/320R台式低温高速离心机,德国Hettich公司;TGL16G常温高速离心机,湖南星科科学仪器有限公司;BT815A半自动生化仪,上海三科仪器有限公司。
2 方法
2.1 50%半乳糖的配制 将半乳糖溶于蒸馏水配成50%溶液,经高温灭菌后,备用。
2.2 分组、造模及给药 大鼠随机分为7组,即正常对照组;模型组;白内停组;莎普爱思组;FS1272滴眼液高、中、低剂量组。各组大鼠每日上午、晚上腹腔注射50%半乳糖液造模,剂量分别为12g/kg、8.4 g/kg,连续29d,其中空白组腹腔注射同容量的生理盐水。造模前3d起开始给药,每组动物分别滴入各自滴眼液0.1ml(正常对照组和模型组滴入生理盐水),FS1272高剂量组9次/d、FS1272低剂量组3次/d,其余各组6次/d。连续给药31d。实验动物均由本院动物中心饲以平衡饲料。
2.3 晶体中SOD、CAT、GSHpx、MDA含量的测定 停药后1日,将大鼠拉颈处死,取出两眼眼球,剪除眼球后壁,完整分离出晶体状,用滤纸吸干晶体表面水分后,迅速称重并记录。立即将各晶体放入匀浆器中,加入适量生理盐水,冰浴下充分研磨5min制成10%的晶体匀浆,然后按试剂盒说明书操作测定SOD、CAT、GSHpx和MDA含量。
2.4 统计学处理 结果以x±s表示,用SPSS统计软件进行方差分析,P<0.05 、P<0.01为差异显著性标志。
3 结果 FS1272滴眼液对大鼠晶体SOD、CAT、GSHpx和MDA含量的的影响 结果见表。①SOD活性,模型组明显低于正常对照组(P<0.01);FS1272滴眼液高、中、低三剂量组和白内停组、莎普爱思组都明显高于模型组(P<0.01)。②CAT活性,模型组明显低于正常对照组(P<0.01);FS1272滴眼液中、低两剂量组和白内停组、莎普爱思组都明显高于模型组(P<0.01)。③GSHpx活性,模型组明显低于正常对照组(P<0.01);FS1272滴眼液高、中、低三剂量组和白内停组、莎普爱思组都明显高于模型组(P<0.01)。④MDA含量,模型组明显高于正常对照组(P<0.01);FS1272滴眼液高、中、低三剂量组和白内停组、莎普爱思组都明显低于模型组(P<0.01)。 结果显示,FS1272滴眼液高、中、低剂量组晶体内 SOD、CAT、GSHpx 活性明显高于模型组,而脂质过氧化产物MDA含量则明显低于模型组,表明FS1272滴眼液可提高大鼠晶体内抗氧化酶的活性,减少晶体氧化损伤。
表 FS1272滴眼液对大鼠晶体SOD、CAT、GSHpx和MDA含量的影响(略)
与正常对照组比较:#P<0.01,与模型组比较:*P<0.01 ①晶体数:正常对照组(21) 、模型组(23) 、白内停对照组(21)、莎普爱思对照组(21)、FS1272滴眼液中剂量组(23)外,其余各组同上。②晶体数:正常对照组(24) 、模型组(24) 、白内停对照组(22)、莎普爱思对照组(22)、FS1272滴眼液高剂量组(20)、FS1272滴眼液中剂量组(24)、FS1272滴眼液低剂量组(20)。
4 结论 氧化损伤是诱发老年性白内障(SC)的主要因素[2],衰老导致晶体抗氧化酶活性下降,晶体内自由基增加,使晶体蛋白变性、混浊,导致白内障。SOD、CAT和GSHpx是晶状体内最重要的三种抗氧化酶,在清除自由基,减少脂质过氧化产物,保护晶状体的氧化损伤方面发挥着极其重要的作用。本实验晶体生化测定显示FS1272滴眼液能明显提高SOD、CAT、GSH-px活性及降低MDA含量。表明FS1272滴眼液能延缓白内障发生和发展,可能通过提高大鼠晶体内抗氧化酶的活性,减少过氧化产物的产生,加强对晶体的保护作用。
【参考文献】
[1] 张士元.我国白内障的流行病学调查资料分析[J].中华眼科杂志,1999,35(5):336.
[2] 徐雯,姚克.氧化性白内障晶状体中蛋白和细胞的改变[J].眼科研究.2005,23(2):137.
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