【摘要】 探讨Ⅱ型糖尿病患者角膜上皮损伤、结膜杯状细胞及上皮细胞病理改变与糖尿病病程、血糖控制情况及糖尿病性视网膜病变间的相关关系.［方法］给51例(102眼)Ⅱ型糖尿病患者和20名（40眼）正常人进行结膜印迹细胞学检查和角膜荧光素染色试验，观察结膜上皮细胞鳞状化程度、结膜杯状细胞形状、密度及角膜损伤程度，并与糖尿病病程、血糖控制情况、糖尿病性视网膜病分别进行一元线性相关及回归分析.［结果］与正常对照组比较，糖尿病组患者角膜上皮损伤严重，杯状细胞密度显著降低，结膜上皮细胞的鳞状化级别显著增加，相比较均有显著性差异.杯状细胞密度和结膜上皮细胞鳞状化程度与糖尿病患者血糖控制情况呈显著性相关.［结论］Ⅱ型糖尿病患者是干眼症的易感人群，控制好Ⅱ型糖尿病患者的血糖，可改善角膜上皮、结膜上皮细胞及杯状细胞的病理变化.
【关键词】 结膜疾病 眼表疾病 糖尿病 Ⅱ型
ABSTRACT:OBJECTIVETo study the correlation of the duration, severity and grade of diabetic retinopathy (DR) with the disorders of ocular surface in type 2 diabetic patients.METHODS102 eyes of 51 patients with non insulindependent diabetes mellitus(DM) and 40 eyes of 20 healthy subjects underwent examinations with fluorescein vital staining (FL) and conjunctival impression cytologic analysis (CIC) to observe the degree of conjunctival epithelium squamatization, conjunctival goblet cell shape and density as well as the degree of cormea injury.RESULTSThe average grade of squamous metaplasia and the average score of FL were significantly higher and the mean goblet cell density was significantly lower in diabetic patients than in control subjects. The grade of conjunctival squamous metaplasia, the conjunctival goblet cell density and the score of FL were significantly related to the control condition of DM.CONCLUSIONThe patients of type 2 DM is susceptible population of xeroma, and the blood glucose is controlled well in patients of type 2 DM to be improvement the pathological changes of corneal epithelium, conjunctival epithelium and goblet cells.
Key words:conjunctival diseases;corneal diseases;diabetes mellitus, type2
糖尿病常并发全身多器官并发症，在眼部主要表现为视网膜病理变化及糖尿病性白内障等.多数糖尿病患者常主诉有眼部异物感、烧灼感及畏光等干眼症状，有学者认为糖尿病可通过影响眼表微环境，引起眼表的角膜、结膜及泪液发生变化.本研究观察了糖尿病患者角膜上皮、结膜杯状细胞及上皮细胞病理变化，探讨了与血糖控制情况、糖尿病病程、糖尿病性视网膜病理变化程度的相关性.
1 对象和方法
1.1 对象 51例Ⅱ型糖尿病均在2005年11月至2006年4月间经延边大学医院内分泌科确诊的患者，均符合WHO 1999年的糖尿病诊断标准［1］；年龄为36～76岁；男性为27例，女性为24例.根据糖尿病血糖控制目标和糖尿病性视网膜病变国际分级法［1，2］，将血糖控制情况分为理想、尚可及差3个级别，本组患者中分别为11、19、21例.将糖尿病性视网膜病理分期分为1～5期，分别为17、9、10、13、2例，将病程分为5年以下、5～10年及10年以上，分别为18、24、9例.正常对照组20名为眼科病房陪护的健康者，均无糖尿病病史及糖尿病症状和体征.糖尿病组及正常对照组入选标准：无明确诊断的角结膜病史（细菌性、病毒性、真菌性）；无软或硬性角膜接触镜佩戴史；近4周内无眼部局部用药史；无糖尿病视网膜病变及糖尿病性白内障之外的眼科疾病；无眼部外伤及眼部手术病史；均知情同意.
1.2 方法 各项检查均由同一名医生在相对安静的环境下完成.角膜荧光素染色试验：在进行BUT试验之后观察荧光素染色的角膜表面，将角膜表面分为4个象限，每个象限根据荧光素染色阳性程度，分别记0～3分，共0～12分［3］.结膜印迹细胞学检查：滴1滴4g/L盐酸奥布卡因（日本参天制药株式会社产品）于被检者结膜囊行表面麻醉，2min后将直径为8mm的无菌醋酸纤维素膜滤纸置于颞下球结膜上(粗糙面向下)，用玻璃棒均匀按压3～5s，用眼科镊将滤纸揭下，光面向下（细胞面向上）放置于一端贴有双面胶的载玻片的胶面上固定，向滤纸上滴数滴960mL/L乙醇，固定10min，于4℃条件下保存，行过碘酸PAS染色，并用苏木素（Mayer苏木素）复染，脱水后行中性树脂封片，在10×10倍的光学显微镜下观察.任意选择10个视野大小为0.5mm×0.5mm的范围，行杯状细胞计数，取均值，计算成每mm2内杯状细胞数量.杯状细胞计数时应选择多层细胞铺片占视野的75%以上；观察上皮细胞时，应选择单层上皮细胞铺片占视野75%以上的区域，在低倍镜下观察细胞间距、形态及大小，在高倍镜下观察细胞核的大小及核浆比等.结膜上皮鳞状化程度根据Nelson分级标准［4］进行分级.检测数据均用SPSS11.0统计软件进行处理，以均数±标准偏差（±SD）表示，计量数据比较采用t检验，等级数据比较采用秩和检验，并进行单因素方差分析、线性相关及回归分析.
2 结果
糖尿病组患者角膜荧光素染色试验DE得分为（1.63±1.59）分，正常对照组为（0.50±0.22）分；糖尿病组每个视野平均杯状细胞计数为74±59，正常对照组为121±60；糖尿病组患者平均鳞状化程度为1.87±0.95，正常对照组为0.93±0.92；两组间比较均有显著性差异(P＜0.01).角膜上皮损伤和结膜上皮鳞状化程度、杯状细胞密度与糖尿病患者血糖控制情况呈显著性相关（P＜0.01），与糖尿病病程及糖尿病性视网膜病变程度无显著性相关（P＞0.05）；见表1.表1 51例糖尿病组患者眼表改变指标与糖尿病病程、血糖控制情况及糖尿病视网膜病变程度的关系
3 讨论
角膜荧光染色试验主要反映角膜上皮缺损程度，包括上皮再生迟缓、浅层点状角膜炎、微囊性水肿、持续性上皮损失、浅层角膜溃疡及大疱形成等［5］.本实验结果表明，糖尿病组患者角膜上皮损伤较正常对照组严重，组间比较有显著性差异，原因可能与高血糖引发角膜感觉神经病变，使三叉神经对角膜的营养作用下降等有关［6］，亦可能与角膜敏感度下降、瞬目减少及角结膜干燥等有关.印迹细胞学技术是使用不同的材料来粘取眼表上皮细胞，研究整个角结膜的细胞形态、排列方式、杯状细胞密度及细胞病理学改变的简易而有效的方法.因它有经济、快速、可重复、无痛、无或最小化损伤正常组织等优点，已替代活体组织检查方法.本研究结果发现，与正常人相比较，糖尿病患者结膜杯状细胞密度显著降低，结膜上皮细胞鳞状化程度明显.稳定的泪膜是维持眼部舒适的基础之一，而结膜杯状细胞的数量与泪膜稳定性有密切关系，因为结膜杯状细胞分泌的粘蛋白成分既参与泪膜的构成，又可增加眼表面的亲水性［7］.另外，角膜上皮损伤、结膜上皮细胞鳞状化程度及杯状细胞密度与患者血糖控制情况有关，而与病程、糖尿病性视网膜病理变化程度则无相关性，与Dogue等［8］的研究结果相符.综上所述，虽然不能肯定糖尿病病程和糖尿病性视网膜病变对眼表疾病有直接的影响，但只要血糖控制良好，即有望改善角结膜的病理变化，缓解或消除糖尿病性干眼症的症状.
【参考文献】
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［6］ Hyndiuk RA, Kazarian EL, Schultz RO, et al..Neurotrophic corneal ulcers in diabetes mellitus［J］.Arch Ophthalmol，1977，95：2193.
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