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二、检测bFGF的作用及意义
Richardson等［6］比较了bFGF对不同日龄鼠晶状体上皮细胞的促纤维化作用，发现随鼠日龄增长，晶状体上皮细胞逐渐延长、弯曲，细胞器减少，特殊细胞突触形成延迟，同时β、γ-晶状体蛋白合成也随之减缓。由此说明bFGF对晶状体上皮细胞的促纤维化作用与年龄呈负相关。未见比较bFGF对不同年龄人晶状体上皮细胞的促增殖作用的文献报道。
PCNA是一种细胞周期调节蛋白，为DNA多聚酶辅助蛋白，对DNA多聚酶活性具有调节作用，其表达与细胞增殖关系密切。通过PCNA检测细胞增殖情况，结果与经典检测方法，如氚-胸腺嘧啶脱氧核苷酸摄入法、5-溴脱氧尿核苷摄入法、DNA含量法相符，尤其与5-溴脱氧尿核苷摄入法呈直线相关，因此PCNA被广泛用为衡量细胞增殖状况的检测指标［7］。
本实验以PCNA为检测指标，对bFGF促进白内障患者HLEC增殖问题进行研究，总结出bFGF对白内障患者HLEC具有显著促增殖作用（P＜0.01）；随年龄增长，该作用逐渐减弱（P＜0.05），与年龄呈负相关性（P＜0.01）。同时，bFGF受体表达数量亦随年龄增长逐渐减少(P＜0.01)，与年龄呈负相关性（P＜0.01），表现为老年组最低，其次为青年组。
随着年龄增长，bFGF促HLEC增殖作用减弱的机制目前尚不清楚。可能与受体及受体后水平调节有关。在鼠眼组织中，随年龄递增，碱性成纤维细胞生长因子受体-1含量逐渐减少［8］；Blanquet等［9］的研究表明，随着动物年龄增长，碱性成纤维细胞生长因子受体含量减少的同时，其磷酸化易感性亦下降。文献报道，6 d与19 d的鸡胚胎晶状体上皮细胞中晶状体蛋白mRNA含量相等，但6 d鸡胚胎组织中mRNA的转录效率却是后者的3倍，提示随着年龄的增长，细胞增殖所需蛋白合成时间延长。本实验中对不同年龄白内障患者HLEC内 bFGF受体表达情况的检测与分析，提示了受体表达水平的差异可能是bFGF促增殖作用与年龄呈负相关的内在原因之一。
Jamal及Solomon［10］在流行病学调查中发现，后发性白内障的发生率50～80岁为11.2%，31～50岁为21.5%，儿童及青少年术后3个月为43.5%。高丹宇等［11］发现儿童白内障患者HLEC细胞密度及PCNA表达均显著高于老年性白内障患者，提示儿童HLEC的增生及分化处于较活跃状态。在本实验中，随着患者年龄递减，HLEC的bFGF受体表达数量增高，bFGF对HLEC促增殖作用增强，提示年轻白内障患者术后细胞增生迅速，在具有较强修复机制的同时，易形成后囊混浊。此结果有助于解释儿童后发性白内障高发的原因。
鉴于bFGF在后发性白内障形成过程中的重要作用，以及其促HLEC增殖作用由受体及受体后调节水平控制，我们可从阻断bFGF与其受体结合及控制bFGF与受体结合后效应两条途径，寻找预防HLEC增殖的方法及治疗后发性白内障的药物，为临床治疗提供参考。
图1 老年实验组PCNA蛋白表达 S-P免疫组织化学法染色×100
图2 老年对照组PCNA蛋白表达 S-P免疫组织化学法染色×100
图3 少年实验组PCNA蛋白表达 S-P免疫组织化学法染色×100
图4 少年对照组PCNA蛋白表达 S-P免疫组织化学法染色×100
基金项目：浙江省自然科学研究基金资助项目（396497)
作者单位：申屠形超（310009杭州，浙江大学医学院附属第二医院眼科中心)
姚克（310009 杭州，浙江大学医学院附属第二医院眼科中心)
孙朝晖（310009杭州，浙江大学医学院附属第二医院眼科中心)
余海（310009 杭州，浙江大学医学院附属第二医院眼科中心)
杨亚波（310009杭州，浙江大学医学院附属第二医院眼科中心）
参考文献
1，申屠形超，姚克，沈凌，等. bFGF对人晶状体上皮细胞增殖的影响.眼科新进展，2000，20：118-120.
2，Nishi O, Nishi K, Fujiwara T,et al. Effects of the cytokines on the proliferation of and collagen synthesis by human cataract lens epithelial cells. br J Ophthalmol,1996,80:63-68.
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4，James ER，Mclean JDC, Kent DG,et al. Cytokine mRNA expression in rabbit lens epithelium following lens extraction and IOL implantation. Invest ophthalmol Vis Sci,1996，37：S988.
5，Namiki M. Quantification of basic fibroblast growth factor (bFGF) and transforming growth factor (TGF alpha) in rabbit aqueous humor after intraocular lens implantation. Nippon Ganka Gakkai Zasshi,1994,98:334-339.
6，Richardson NA, McAvoy JW, Chamberlain CG. Age of rats affects response of lens epithelial explants to fibroblast growth factor. Exp Eye res,1992,55:649-656.
7，宋跃，赵劲松，张晓光，等.血管内皮生长因子对人胚胎视网膜血管发生的调节作用.中华眼底病杂志,1999,15:12-15.
8，de Iongh RU, Lovicu FJ, Hanneken A,et al. FGF receptor-1 (flg) expression is correlated with fibre differentiation during rat lens morphogenesis and growth.Dev Dyn,1996 ，206:412-426.
9，Blanquet PR, Paillard S, Courtois Y. Phosphorylation and lipocortin-like activity of a 34-kD surface protein in lens epithelial cells: relation to mitogenesis induced by basic fibroblast growth factor. Growth Factors,1990,3:15-23.
10，Jamal SA, Solomon LD. Risk factor for posterior capsule pearling after uncomplicated extracapsular cataract extraction and plano-convex posterior chamber lens implantation. J Cataract Refract Surg,1993 ,19:333-338.
11，高丹宇,惠延年,吉启安,等.小儿与老年白内障晶体上皮细胞密度及增殖细胞核抗原表达.中华眼科杂志,1998,34:355-357. 上一页 [1] [2] |
