结果

　　(一)患者与对照组外周血淋巴细胞免疫表型的比较见表1，患者的CD4，CD5，CD8，CD10，CD11b,CD15,CD16，CD19，CD23，CD25，CD41，CD57，CD69，以及HLA-DP、DR的抗原阳性细胞显著高于正常人，CD45，CD45 RA的抗原阳性细胞明显低于正常人，其余的差异无显著。

　　表1　患者与对照组外周血淋巴细胞免疫表型的比较

　　(二)患者与对照组外周血T细胞及其亚群HLA-DR，CD69，CD71，CD25在CD3和CD8表达的比较见表2，患者外周血同时表达CD3和HLA-DR的细胞为CD3阳性细胞的45.60%，而对照组为10.33%，表明患者外周血活化T细胞明显高于正常人。患者HLA-DR在CD8的表达率为54.10%，对照组为9.38%。此外，患者的CD69，CD25在CD3，CD8的表达率明显高于正常人。

　　表2　患者和正常人T细胞及其亚群HLA-DR,CD69,CD71,CD25在CD3和CD8的表达

　　患者和对照组外周血培养72 h T细胞活化的比较见表3，患者的HLA-DR，CD69，CD25在CD8的阳性表达率明显高于对照组。

　　表3　患者和对照组外周血培养72h T细胞活化的比较

　　患者与对照组外周血加PHA体外培养72 h T细胞活化的比较见表4，患者的CD69在CD3的阳性表达率明显高于对照组，HLA-DR，CD69，CD25在CD8的阳性表达率明显高于对照组。

　　表4　患者与对照组外周血加PHA体外培养

　　患者与对照组外周血加入PDB体外培养72 h T细胞活化的比较见表5，患者的CD69和CD25在CD8的阳性表达率明显高于对照组。

　　表5　患者与对照组外周血加PDB体外培养

　　研究表明，蚕蚀性角膜溃疡患者存在免疫调节紊乱。然而，其具体环节尚不清楚。有报道［4，5］，本病患者外周血抑制性T细胞较辅助性T细胞数量减少。李蕊红等认为本病患者外周血T淋巴细胞亚群无明显变化［6］。本结果表明，患者外周血CD4，CD5，CD8，CD10，CD11b，CD15，CD16，CD23，CD25，CD41，CD57，CD69，HLA-DP，HLA-DR等抗原表达阳性淋巴细胞明显高于正常人。CD4，CD5，CD8，是T细胞的分化抗原，CD10，CD19，CD23是B细胞的分化抗原，CD11b是补体受体(C3)，CD15介导白细胞和内皮细胞结合，CD16参与NK细胞活化，CD25组成高亲合力受体，与T细胞生长和增殖有关，CD69为一活化诱导分子。它们的异常高表达提示本病患者在多个环节存在着免疫调节紊乱。

　　器官特异性自身免疫性疾病的靶细胞可异常表达HLA-Ⅱ类抗原，一旦靶细胞异常表达Ⅱ类抗原，就可能以组织特异性方式把自身抗原提呈给自身反应性T细胞，从而启动自身免疫反应。本研究结果显示，患者外周血HLA-DP和DR表达较对照组明显升高。文献报道，蚕蚀性角膜溃疡病变角膜上皮和基质细胞，球结膜上皮细胞异常表达HLA-DR抗原［7］。HLA-Ⅱ类抗原在病变局部和外周血异常表达，提示患者机体对角膜组织发生了自身免疫反应。

　　HLA-DR为活化T细胞表达的分子，而静止的T细胞不表达HLA-DR［8］。因此，HLA-DR的表达常被作为T细胞活化的指标。由于所有B细胞和活化的T细胞均可表达HLA-DR，故只有同时使用CD3抗体和抗HLA-DR抗体进行双荧光标记，方能根据CD3和HLA-DR双阳性细胞数来确定活化的T细胞的比率［9］。本结果显示，正常人外周血CD3和HLA-DR双阳性的占CD3阳性细胞的10.33%。然而，本病患者外周血T细胞表达HLA-DR的细胞明显高于正常人。表明患者外周血T细胞在体内可能受到某种自身抗原或与自身抗原相似的分子刺激而过度活化［9］。

　　CD69是一种早期激活抗原，激活的T细胞，B细胞及巨噬细胞均表达此抗原。CD69阳性细胞在CD3和CD8的高表达提示患者机体处于免疫高活化状态。CD25是IL-2的受体，与IL-2增殖信息的传递有关。患者外周血T细胞及其亚群CD25的高表达说明患者外周血携带IL-2受体的T细胞明显高于正常人，患者外周血T细胞受到抗原刺激后更容易进入增殖状态。

　　研究表明，PHA和PDB对细胞活化的通路不同，PHA的活化作用是通过与T细胞表面的TCR肽链的结合而发挥的，PDB是一种蛋白激酶C的激活剂，它能进入细胞内激活蛋白激酶C而活化T细胞，绕过了活化信息跨膜传递分子如TCR/CD3等。我们的结果显示，本病患者的T细胞对PHA和PDB体外刺激的反应均明显高于正常人，表明患者机体的T细胞对不同作用部位和作用机制的有丝分裂原的刺激都处于高反应状态。用PHA和PDB刺激后，以HLA-DR，CD69，CD25在CD8阳性表达升高为主，其机制有待研究。

　　参考文献

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　　2　Brown SI,Mondino BJ,Rabin BS.Autoimmune phenomenon in Mooren's ulcer.Am J Ophthalmol,1976,82:835.

　　3　Gottsch JD,Lie SH,Minkovitz JB,et al.Autoimmunity to a cornea-associated stromal antigen in patients with Mooren's ulcer.Invest Ophthalmol Vis Sci,1995,36:1541.

　　4　Murray PI,Rahi AH.Pathogenesis of Mooren's ulcer: some new concepts.Br J Ophthalmol,1984,7:903.

　　5　赵京城，金秀英.蚕蚀性角膜溃疡发病机制的探讨.中华眼科杂志，1994，30：4.

　　6　李蕊红，张文华，郭玉华.蚕蚀性角膜溃疡患者外周血与病变处T淋巴细胞亚群分布的比较.眼科，1995，1：26.

　　7　王　铮，陈家琪，郑湖玲.蚕蚀性角膜溃疡及邻近球结膜的免疫组化研究.中华眼科杂志，1994，30：218.

　　8　Crabtree GR.Contingent genetic regulatory events in T lymphocyte activation.Science,1989,23:355.

　　9　蔡小嫦，林　泽，孙　荭，等.白癜风患者外周血的T淋巴细胞异常活化.中国病理生理杂志，1994，10：489.

　　(1998年6月23日收稿，1998年3月1日修回)

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