作者：陈淑娟 作者单位：(200433)中国上海市，第二军医大学第一附属医院
方法：将SD大鼠12只随机分为对照组及EPO组，均选取左眼为实验眼。造模前先进行左眼闪光视网膜电图(flash electroretinogram，FERG)和闪光视觉诱发电位（flash visual evoked potentials, FVEP）检查，之后采用重击法致2mo龄SD雄性大鼠（体质量180～220g）左眼挫伤，伤后立即给予EPO组注射rhEPO：5U（5μL），对照组玻璃体注射同等剂量生理盐水，伤后1，4，7，14d分别进行左眼FERG和FVEP检查。结果：造模前两组的FERGb波和FVEPP100波的振幅值无显著性差异(P>0.05)。重击法造模后，对照组实验眼的FERGb波和FVEPP100波的振幅值在伤后第1d均降至最低水平，以后逐渐恢复，第14d未能恢复造模前水平(P<0.05)。但EPO组与对照组FERGb波和FVEPP100波的振幅值差异明显，实验结束时EPO组左眼FERGb波和FVEPP100波的振幅值明显高于对照组（P<0.01），接近造模前水平(P>0.05)。结论：rhEPO可以显著改善大鼠眼挫伤后视网膜缺血时的FERGb波和FVEPP100波振幅，起到保护视功能的作用。
【关键词】 重组人促红细胞生成素 眼挫伤 视网膜 闪光视网膜电图 觉诱发电位
0引言
外伤伴发视神经损伤的发病率近年来有上升趋势，视神经损伤多导致严重视功能障碍甚至永久失明，而对挫伤导致的视神经损伤的治疗仍是目前的难点。近来研究发现促红细胞生成素（EPO）可以通过血视网膜屏障[1]，对损伤后的视网膜神经元有保护作用[2]。我们采用重击法制成大鼠眼挫伤模型，动态连续观察rhEPO对眼电生理，包括闪光视网膜电图(FERG)和闪光视觉诱发电位（FVEP）的影响，探讨rhEPO对眼挫伤大鼠视功能的保护作用如下。
1材料和方法
1.1材料
rhEPO(公司名称：Roche Registration Ltd，上海罗氏制药有限公司分装)；视觉电生理检测系统(苏州六六视觉科技股份有限公司产品YZ56型)；动物角膜电极（上海第一人民医院吴晓平工程师惠赠）。2mo龄SD大鼠(第二军医大学实验动物中心提供) 12只，雄性，体质量180～220（平均203）g。自由饮食，分笼喂养，实验前裂隙灯显微镜及直接眼底镜检查眼部无异常。随机分为EPO组与对照组各6只大鼠，均取左眼为实验眼。
1.2方法
参考文献[3]制作仿Allen打击装置，所有动物称质量后用100mL/L水合氯醛以3.5mL/kg的剂量行左下ip麻醉完善后，用打击装置造成眼球挫伤，致伤后立即移去打击装置，EPO组玻璃体注射rhEPO 5U,对照组致伤后玻璃体注射同等剂量的生理盐水，然后，把动物放入垫有新垫料的另一饲养箱内，室温维持在25℃左右直至苏醒。两组在相同条件下分笼饲养。分别于致伤前和致伤后1，4，7，14d 共5个观察时相点进行FERG和FVEP检查，每个时相点6只大鼠。按照国际标准化的记录方法记录白色闪光刺激的FERGb波和FVEPP100波。于致伤前和致伤后1，4，7，14d的上午08∶00开始麻醉(方法同前)，以10g/L新福林和5g/L托品酰胺滴眼液10min内滴实验眼3次，充分散大瞳孔(直径大约5mm)。然后将大鼠暗适应20min后角膜接触式电极法进行FVEP和FERG检查。角膜电极阻抗小于10kΩ。地电极刺入同侧耳缘皮下，参考电极刺入前额皮下。角膜环形电极直接置入结膜囊内与角膜表面接触。放置角膜电极之前用10g/L地卡因表麻。角膜电极清洁消毒后表面滴一滴粘稠剂(甲基纤维素)。用全视野闪光刺激器，角膜平面距离白色刺激光30cm。刺激光强1.28cds/m2 ，刺激频率1Hz，通频带宽1～100Hz。每只大鼠视网膜FERG和FVEP均连续3次测量，取平均值。两次刺激光间隔时间5s。分别观察FERGb波和VEPP100波振幅值。ERGb波振幅指a波波谷至b波波峰之间的垂直距离，大小以μV为单位。VEPP100波波幅指P100波前的N波波谷至P100波波峰之间的垂直距离，大小以μV为单位。 表1眼挫伤大鼠暗适应FERGb波和FVEPP100波振幅（略）
统计学处理：采用SPSS13.0统计软件包处理记录数据。方法：重复测量数据的两因素多水平方差分析。
2结果
2.1暗适应FERGb波振幅
造模前对照组和EPO组暗适应FERGb波振幅比较无显著性差异（P>0.05）。造模后1d两组实验眼的FERGb波振幅值均降至最低水平(P<0.01)，以后逐渐恢复，14d对照组未能恢复到造模前水平(P<0.05)，EPO组接近造模前水平（P>0.05）。两组FERGb波的振幅值在造模后14d差异明显，EPO组左眼FERGb波振幅值明显高于对照组（P<0.01,表1）。数据的球形检验结果P<0.01，不满足球形假设，需要校正，采用GreenhouseGeisser的校正结果，得到方差分析结果：F组间=16.715，P<0.01；F时间=124.857，P<0.01；F交互作用=4.515，P<0.05。分组因素、时间因素以及时间因素和分组的交互作用有统计学意义。
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