程茗   贺翔鸽

第三军医大学大坪医院眼科   400042

目的：通过检测Nogo66蛋白对慢性高眼压大鼠视网膜微环境的改变，探讨Nogo66蛋白疫苗对慢性高眼压大鼠视网膜神经保护作用机制。

方法：正常成年SD大鼠30只，532-二极管激光建立大鼠双眼慢性高眼压模型。随机分为Nogo66弗氏佐剂疫苗组（Nogo66组）、卵清蛋白弗氏佐剂疫苗对照组（卵清蛋白组）、弗氏佐剂对照组（佐剂组），每组10只。分别于双后肢皮下注射100μg/300μl Nogo66蛋白弗氏佐剂疫苗、100μg/300μl卵清蛋白弗氏佐剂疫苗或弗氏佐剂300μl，每2周1次，共接种3次。第10周取大鼠双眼眼球，左眼行冰冻切片，免疫荧光法行视网膜CD3、BDNF、GDNF荧光染色标记（一抗：Abcom公司；二抗：北京中山公司），激光共聚焦显微镜观察；右眼分离视网膜，Western Blot法检测视网膜CD3、BDNF、GDNF表达水平。

结果：卵清蛋白组和佐剂组视网膜神经节细胞层可见少量BDNF、GDNF表达。Nogo66组视网膜各层均可见BDNF、GDNF表达，主要分布于神经节细胞层、内核层、外核层；BDNF、GDNF表达水平均显著高于两个对照组。三组视网膜均未见CD3表达。

结论：Nogo66蛋白疫苗接种慢性高眼压大鼠后，大鼠视网膜无T细胞浸入，但可诱导视网膜BDNF、GDNF表达显著增高，可能为其视网膜神经保护作用机制之一。