马瑾   姜利斌   钟勇   谢君   孔璐   李志华   董方田

中国医学科学院   北京协和医院   首都医科大学附属北京同仁医院   同仁眼科中心   首都医科大学分子生物实验室   100730

目的：采用亚阈值经瞳孔温热疗法(TTT)对大鼠视神经乳头温热刺激后观察Hsp60诱导表达以及亚阈值TTT对视乳头及周围组织的超微损伤。

方法：采用810nm二极管激光(激光参数为直径0.5mm、照射时间60s、能量60mW)对BN大鼠视乳头温热刺激后，应用免疫组化染色方法和Western Blot方法观察Hsp60在视神经组织的表达（各组n=8），并对亚阈值TTT照射后1W 视乳头及周围RGCs进行透射电镜观察（n=6）。

结果：通过免疫组化染色在正常对照组检测到Hsp60弱阳性信号，TTT照射后24h、72h、1W显示Hsp60阳性信号明显增强，尤其72h最强；Western Blot显示正常对照组Hsp60有弱表达，TTT照射后24h、72h、1W Hsp60 表达明显增强，尤其72h最强（p<0.001）；亚阈值TTT照射后1 W透射电镜下筛板后视神经纤维密度较正常对照组无明显减少，但神经髓鞘的同心圆形板层结构可见松解、变薄现象；视乳头旁RGCs核被膜轻度内陷，但染色质均匀，胞浆细胞器未见明显改变。

结论：亚阈值TTT视神经乳头温热刺激可诱导Hsp60表达，该结果可应用于通过诱导内源性HSP表达来防治青光眼等视神经病变的实验研究。