黄小勇 阴正勤
第三军医大学西南眼科医院 400038
目的:对体外培养的大鼠视杯视网膜干细胞(OC-RSCs)的成神经节细胞样分化特性进行研究。
方法:分离和培养的Long Evans大鼠尾芽胚期(ED 12.5)OC-RSCs,采用Thy1.1抗体免疫细胞荧光化学染色和流式细胞分析技术,观察不同浓度胎牛血清(FBS)对OC-RSCs成Thy1.1阳性细胞分化特性的影响。
结果:⑴免疫细胞化学染色显示,FBS诱导OC-RSCs向Thy1.1阳性细胞分化。⑵不同浓度FBS诱导OC-RSCs 21天后,Thy1.1阳性细胞的分化比例不同,0.5%FBS诱导后,Thy1.1阳性细胞占91.90%;2.5%FBS诱导后,Thy1.1阳性细胞占57.65%;5%FBS诱导后,Thy1.1阳性细胞占82.18%;10%FBS诱导后,Thy1.1阳性细胞占84.26%。⑶尽管血清诱导后,分化细胞有明显的Thy1.1表达,但Thy1.1阳性细胞形态与体外培养的神经节细胞并不相同:细胞胞体较大,形态不规则,多数呈条索状。
结论:从Thy1.1表达为标志的化学分化角度,OC-RSCs具有较强的成神经节样细胞分化能力,且分化比例具有血清浓度依赖性,其中0.5%FBS诱导作用最为明显。但OC-RSCs分化形成的Thy1.1阳性细胞不具有典型的神经节细胞体外培养形态,这可能与本实验中的血清诱导分化条件并不适于神经节细胞生长成熟有关。
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