作者：徐国兴，胡建章，潘永明，王婷婷，郑卫东，林 雯

　　摘要: 目的  探讨转化生长因子β 1 （TGF-β 1 ）和基质金属蛋白酶-2，9（MMP-2，9）在糖性白内障晶状体上皮细胞中的表达及意义。  方法  采用免疫组织化学技术检测TGF-β 1 及MMP-2，9在糖性白内障（23例）和正常晶体状体（7例）上皮细胞中的表达。  结果  TGF-β 1 与MMP-2，9在糖性白内障晶状体上皮中的阳性表达率显著高于正常晶状体（P<0.01），且TGF-β 1 与MMP-2、MMP-9均为正相关。  结论  TGF-β 1 介导的MMP-2，9表达的失衡，对糖性白内障晶状体前后囊膜下的纤维化发生、发展起重要作用。
    
　　关键词:  白内障;金属蛋白酶类;转化生长因子β         
      
　　为探讨转化生长因子β 1 （TGF-β 1 ）和基质金属蛋白酶-2，9（MMP-2，9）在糖性白内障发生、发展中的作用及相互关系，笔者对23例糖性白内障晶状体采用免疫组化技术检测晶状体上皮细胞中TGF-β 1 、MMP-2，9的表达，报告如下。
    
　　1 材料与方法
    
　　1.1 一般资料 随机收集2001年至今本院确诊为糖尿病性白内障并行小切口超声乳化白内障手术患者23例，中位年龄37.6岁（27～43岁），男性13例，女性10例，均排除其它眼部疾患。标本采集步骤为:小切口超声乳化白内障手术中，前房注Healon，行连续环形撕晶状体前囊膜D约6mm，立即将取出的晶状体前囊膜置于中性福尔马林固定48h，石蜡包埋。取7例因外伤的正常透明晶状体作为对照组，中位年龄28.6岁（22～38岁），男性5例，女性2例。取晶状体前囊膜，立即置于中性福尔马林固定48h，石蜡包埋。
   
　　1.2 方法 取组织蜡块制成3～5μm的切片。兔抗人TGF-β 1 多克隆抗体，鼠抗人MMP-2、MMP-9单克隆抗体及SP试剂盒均购自福州迈新生物技术工程公司。免疫组化步骤按SP试剂盒操作。以PBS代替一抗作为阴性对照，以购自福州迈新生物技术工程公司的标准阳性对照片为阳性对照。
   
　　1.3 结果判定 阳性细胞为呈棕黄色颗粒的阳性反应产物。光镜下随机选择观察50个晶状体上皮细胞，以阳性细胞占细胞总数的百分比表示阳性表达程度。0～10%为阴性（-）;11%～25%为弱阳性（+）;26%～50%为阳性（++）;>50%为强阳性（+++）。　　
　　1.4 统计分析 两组间率的比较采用χ 2 检验、Fisher精确概率法;两两指标间阳性表达率相关性采用Spearman等级相关检验，P<0.05为差异有显著性。
    
　　2 结 果
    
　　2.1 TGF-β 1 蛋白表达 阳性产物位于细胞质。糖性白内障LEC TGF-β 1 表达明显，染色呈棕黄色，正常LEC中仅见散在细胞质染色，TGF-β 1 表达呈淡黄色（图1）。
   
　　2.2 MMP-2和MMP-9蛋白的表达 糖性白内障LEC中MMP-2和MMP-9均呈阳性表达，细胞质中可见棕黄色颗粒均匀分布;正常LEC中未见MMP-2，9表达（图2）。
   
　　2.3 两组LEC中MMP-2、MMP-9、TGF-β 1 的表达情况及相关分析（表1） 糖性白内障LEC中MMP-2、MMP-9和TGF-β 1 蛋白表达与正常LEC对比差异有显著性;经Spearman等级相关分析，TGF-β 1 与MMP-2、9阳性表达间均存在正相关（r=0.764，0.820，P>0.01）。
    
　　3 讨 论
    
　　糖性白内障晶状体主要病理学变化是晶状体上皮细胞（LEC）的异常增殖、迁移、分化引起前后囊下的纤维化、混浊 ［1］ 。已知LEC能分泌一层膜样物质称晶状体囊膜，构成LEC的细胞外基质（ECM），正常成分主要是Ⅳ型胶原和层黏蛋白，它们对调节细胞正常的粘附、增殖、移行、分化等生物学行为具        

　　表1  糖性白内障晶状体与正常晶状体上皮细胞中TGF-β 1 、MMP-2、MMP-9的表达　略
     
　　图1  TFG-β　略    
    
　　有重要作用。MMP是分解ECM成分的重要酶类，其中明胶酶（Ⅳ型胶原酶），包括MMP-2的72U和MMP-9的92U，不仅可水解细胞间的基质成分，还可有效地分解基底膜的主要成分―――Ⅳ型型胶原蛋白，两者的过度表达与多种纤维化性疾病的发生、发展密切相关 ［2］ 。

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