赵少贞 邓志宏 张未娟
天津医科大学眼科中心 天津医科大学眼科中心 天津医科大学眼科中心 300070
目的:原代培养豚鼠视网膜色素上皮细胞(RPE,Retinal Pigment Epithelial cells),观察视黄酸受体(RAR)抑制剂LE540对豚鼠RPE细胞的生长和对其分泌TGF-β2的影响。
方法:取3周的三色豚鼠,分离色素膜,胰酶消化法收集RPE细胞培养。反复贴壁法纯化。3-5代用于实验,分别加入浓度为2.5×10-6、5×10-6、10×10-6、50×10-6M 的LE540,培养24小时后用MTT法检测细胞增殖情况,ELISA法测定加入5×10-6M LE540 2h、6h、8h后,RPE细胞分泌的TGF-β2量。
结果:培养的RPE细胞原代5-7天长满,细胞色素丰富,近六角形,角蛋白染色鉴定阳性。MTT结果显示5×10-6、10×10-6M的LE540对RPE细胞增殖有抑制作用(P<0.05),50×10-6M时抑制作用最明显,细胞大部死亡。ELISA法测定结果示2h,6h,8h时TGF-β2的分泌降低(P<0.05),随时间的延长,分泌量无明显变化。
结论:原代培养可以得到较纯、生长较快的豚鼠RPE细胞。浓度在5×10-6M以上的LE540对RPE细胞生长有抑制作用,随浓度增加抑制作用明显。5×10-6M的LE540作用于豚鼠RPE细胞后使TGF-β2分泌量降低。本研究将为探讨RA通过调控RPE细胞分泌TGF-β2影响近视发展提供依据。
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