刘贺婷   廖荣丰   朱洁

安徽医科大学第一附院   230022

目的：建立器官培养保存角膜的方法，根据已有的配方稍作改进探求一种操作更为简便的脱水方法，比较两种方法的脱水效果和对保存后猪角膜内皮细胞的影响。

方法：将24只新鲜猪角膜随机分成A、B两组，分别悬浮于A、B两种对应的保存液中保存。A法将每4只角膜分别放入保存液A中保存4天、11天、18天，使用前转移到含5%葡聚糖T500的运输液A中脱水3天；B法直接将每4只角膜分别放入含1.35%硫酸软骨素的保存液B中保存7天、14天、21天，使用时直接取用。保存后的每个角膜常规测厚度、做台盼蓝-茜素红染色观察内皮细胞形态、计算内皮细胞数量和台盼蓝阳性细胞数，TUNEL法测定内皮细胞凋亡。测定后比较保存前和保存后第7、14、21天时猪角膜的水肿程度、内皮细胞数量及丢失率、台盼蓝阳性率、内皮细胞凋亡情况。

结果：两种方法保存的猪角膜在3周内均透明。在第7、14、21天的B组角膜厚度均大于A组，差异有显著性（P值均<0.01）。A、B两组在保存第7天和第14天时CEC丢失率和凋亡率的比较均无显著性差异（P值均>0.05），第21天时A组的CEC丢失率、台盼蓝阳性率和凋亡率均比B组低，差异有显著性（P值均<0.05）。保存期间的污染率两组均为8.3%。

结论：两种方法保存角膜均可行。经典的葡聚糖脱水法脱水效果更为明显；改造的脱水方法操作较为简便，但脱水效果不如前者。2周内两种方法对角膜的影响大致相同；保存时间延长至3周时，前者保存的角膜活性高于后者。