陈剑   杨水平   陈建苏

暨南大学附属第一医院   暨南大学医学院   510630

目的：探讨人羊膜上皮细胞在特定环境下定向诱导分化为结膜上皮及构建组织工程结膜用于眼表重建的可能性。

方法：人羊膜上皮细胞在兔去上皮结膜基质和结膜匀浆培养液诱导环境下培养，角蛋白CK4、CK8、CK13、CK18及MUC5AC免疫组化鉴定，ELISA法检测不同时间培养液中MUC5AC浓度，RT-PCR检测分化细胞MUC5AC基因表达；MTT、群体倍增时间、量子点标记示踪等方法探讨分化细胞的生物学特性；量子点标记的分化细胞接种于脱细胞羊膜上，构建组织工程结膜，并移植于实验动物模型。

结果：经诱导培养后，分化细胞呈现结膜上皮细胞和杯状细胞表型，1-7天内培养液中均有微量MUC5AC分泌且逐渐升高，并表达MUC5AC基因；MTT法显示分化细胞活性在1-4天内呈上升趋势，第5天开始下降；生长曲线和群体倍增时间揭示分化细胞增殖能力强；共聚焦荧光扫描显微镜显示分化细胞呈良好的生长分裂状态；成功构建类似正常结膜结构的组织工程结膜，移植于实验动物模型，实验观察期间，植片在位、完整，免疫组化显示呈结膜上皮细胞和杯状细胞表型，PAS染色阳性。

结论：人羊膜上皮细胞可分化为具有部分生理功能的结膜上皮样细胞和杯状细胞，并由此构建的组织工程结膜重建模型兔完整眼表。