陈剑 杨水平 刘小勇 金玲 赵芳 苗晓晴
暨南大学附属第一医院 510630
目的:探讨不同种属的新西兰兔和人的羊膜上皮细胞在不同的特定诱导环境下定向分化并结合组织工程学等技术重建眼表的可能性。
方法:新西兰兔和人的羊膜上皮细胞分别在不同诱导环境下培养,免疫组化等方法鉴定分化细胞的细胞表型,MTT、RT-PCR、群体倍增时间、量子点示踪标记、流式细胞仪、携带人端粒酶基因和绿色荧光蛋白的慢病毒转染等方法研究分化细胞生物学特性;分化细胞分别以纤维蛋白胶、脱细胞羊膜等为载体,构建组织工程角膜和组织工程结膜,并行动物模型实验。
结果:新西兰兔和人的羊膜上皮细胞分别经不同条件诱导培养后,分化细胞呈角膜上皮和结膜上皮细胞表型;群体倍增时间、量子点示踪标记等方法均证实分化细胞呈现良好的生长分裂状态、细胞增殖能力强,并且经携带端粒酶基因慢病毒转染后明显延长分化细胞生长周期;以纤维蛋白胶、脱细胞羊膜为载体均成功构建类似正常角膜和结膜结构的组织工程膜,分别移植于动物模型,实验观察期间,眼表植片在位、完整。
结论:新西兰兔和人羊膜上皮细胞均可分化为具有角膜上皮和结膜上皮的细胞表型,并由此构建的组织工程眼表植片,重建模型兔完整眼表。
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