沈玺 焦秦 钟一声
上海交通大学医学院附属瑞金医院 200025
目的:探讨色素上皮衍生因子(PEDF)对糖尿病大鼠视网膜Müller细胞谷氨酰胺合成酶(GS)表达的影响。
方法:链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型,采用免疫组化法和实时荧光PCR法检测3个月糖尿病大鼠视网膜谷氨酰胺合成酶(GS)和白细胞介素-1beta(IL-1b)的表达变化,对照组采用相同月龄正常的大鼠;将10μl(0.1μg/μl)PEDF注入3个月糖尿病大鼠玻璃体腔中,对照组只注射相同容积的PBS,48小时后采用采用免疫组化法和实时荧光PCR法检测视网膜GS和IL-1b表达的变化。将视网膜Müller细胞置于高糖环境下培养,实验组中加入100ng/mlPEDF,24h后通过Western蛋白印迹法和实时荧光PCR法检测100ng/mlPEDF对Müller细胞GS和IL-1b表达的改变。
结果:实时荧光PCR法从基因水平和免疫组化法从蛋白质水平检测都显示,相对于正常的大鼠,3月糖尿病大鼠的GS表达降低而IL-1b的表达升高(P<0.01);3月糖尿病大鼠玻璃体腔注射10μl(0.1μg/μl)PEDF48小时后,IL-1b的表达下降,GS的表达升高(P<0.05)。在高糖环境下,通过实时荧光PCR法和Western蛋白印迹法检测都显示,PEDF可以下调IL-1b的表达,而上调GS的表达(P<0.05)。
结论:对于糖尿病大鼠,PEDF可能通过下调Müller细胞中IL-1b的表达,来上调GS的表达,从而改善谷氨酸循环,抑制神经节细胞的死亡。 |