吴建国 周小煦 孙国玲 陈陆霞 李筱荣

　　天津医科大学眼科中心 300070

　　目的：研制大鼠视网膜下腔显微注射操作系统，提高本技术的成功率。

　　方法：1.改装5ul微量注射器针头为30G;制作15度大鼠角膜接触镜;制作多自由度微量注射泵。2、10只SD大鼠麻醉后，常规洗眼、散瞳，固定鼠的体位，右眼朝向正上方。手术显微镜下，在11 点钟方位打开球结膜，钝性分离，暴露巩膜;角巩缘后2 mm 穿过浅层巩膜预置10-0 角膜缝线，在预置缝线中间处先用28G针头与巩膜成15°近水平刺穿巩膜，再用28G针头在6 点钟方位的角膜处行前房穿刺，降低眼内压。放置角膜接触镜，微量注射器吸取2ul美蓝溶液;调整注射泵上的微量注射器针头对准巩膜穿刺口，旋转操作台上的手柄使进针的角度、方向与巩膜隧道穿刺口一致，30G针头顺巩膜穿刺孔刺穿脉络膜，伸入视网膜下腔，角膜接触镜下看清针尖位于视网膜下腔后，缓慢注射0.1%美蓝溶液，边注边向深处推进2~3 mm，每只眼注射2μl，当手术显微镜下清楚可见眼底局部视网膜变白，且呈扁平隆起时，注射结束。留置针头5min后，反方向旋转手柄缓慢拔出注射器，将预置的缝线打结。3、24h后处死取材，常规固定、脱水、石蜡包埋大鼠眼球，组织学切片。

　　结果：组织学观察可见美兰溶液存留在视网膜下腔，脉络膜、视网膜色素上皮、视网膜神经上皮层无明显损伤。

　　结论：本操作系统能降低医源性损伤，建立安全、精确、简便、可控的大鼠视网膜下腔注射技术。