陈鹏 杨玲玲 王晔 何文晓 王宜强

　　山东省眼科研究所 266071

　　目的：探讨Na+/H+交换调节因子(Na+/H+exchanger regulatory factor 1，NHERF1)对HUVEC细胞内PKB磷酸化水平、细胞周期分布以及基质金属蛋白酶(MMP)表达的影响，进而阐明其影响人血管内皮细胞增殖、迁移和生存的分子机制。

　　方法：通过36K小鼠基因组芯片比较碱烧伤角膜和正常角膜的差异表达基因，应用实时定量PCR验证NHERF1的高表达。HA-NHERF1wt质粒和空质粒分别稳定转染HUVEC细胞系，经Western印迹验证后，应用Western印迹法检测NHERF1对PKB磷酸化水平的影响;通过流式细胞仪检测细胞周期分布;收集无血清培养基，应用Western印迹法检测NHERF1对MMP-2和MMP-9表达的影响;采用MTT法检测细胞的增殖活性;应用划痕法检测细胞的迁移能力。

　　结果：转染的外源性NHERF1 cDNA片段已整合到基因组中，可显著抑制细胞的增殖和迁移能力并能促进细胞凋亡。与对照组细胞相比，NHERF1能明显下调PKB的磷酸化水平，对MMP-2和MMP-9的表达也有明显的下调作用，但NHERF1对细胞周期分布及进程无明显影响。

　　结论：NHERF1可抑制HUVEC细胞的增殖、迁移，此作用可能与其调整PKB的磷酸化水平以及基质代谢有关。