崔志利 康军

　　第四军医大学附属西京医院眼科 中国人民解放军第451医院眼科 710032

　　目的：制备抗大鼠Nogo受体(NgR)单克隆抗体并鉴定。

　　方法：根据大鼠NgR cDNA序列设计引物，利用RT-PCR技术从大鼠脑组织获取大鼠NgR胞膜外区 cDNA，插入载体，筛选后测序;克隆基因并插入带有人IgG Fc段 cDNA的载体pFUSE-Fc中，转染入CHO细胞并表达融合蛋白NgR-hFc;亲和层析纯化蛋白;免疫小鼠，取免疫小鼠脾细胞与Sp2/0细胞融合，用分别预包被NgR-hFc融合蛋白和人IgG ELISA板筛选高亲和力单克隆抗体。

　　结果：克隆到大鼠NgR胞膜外区 cDNA，成功表达融合蛋白，获得4株抗大鼠NgR胞膜外区单克隆抗体，分别为IgG1和IgG2a亚型，腹水效价为10-6左右。

　　结论：成功获得抗大鼠NgR胞膜外区单克隆抗体，为我们下一步工作打下基础。