曾洁萍 段俊国 李强

　　成都中医药大学 610075

　　目的：观察高压对体外培养视网膜神经节细胞神经冲动传导基因表达的影响。

　　方法：以小鼠抗大鼠Thy-1.1单克隆抗体纯化SD乳鼠视网膜细胞悬液，获得视网膜神经节细胞(RGCs)，37℃，5%CO2培养至第5天，见RGCs生长状态良好，细胞轴突明显时将细胞随机分为高压组和空白组，高压组加压到80mmHg，继续培养4小时后，两组同时以Trizol试剂进行总RNA提取。总RNA以NucleoSpin RNA clean-up试剂盒进行纯化后，再通过双链cDNA合成、体外转录合成cRNA、随机引物反转录、KLENOW酶标记cDNA4个步骤进行荧光标记。标记后的cDNA与Oligo芯片杂交，再进行激光扫描，对芯片图像进行分析并把图像信号转化为数字信号;然后进行数据归一化、数据对数变换后用t-test的方法来挑选差异基因，最后用t-test方法结合两倍差异的生物学标准来确定差异表达基因。

　　结果：高压与正常培养的RGCs有7条神经冲动传导基因有表达差异，其中S100b、Pmp22表达上调，Gad1、Cabp1、Gria2、Tac1、Pnutl1表达下调。

　　结论：高压对大鼠RGCs神经冲动传导基因的表达有确定的影响。