张海涛 曾强
第三军医大学西南眼科医院 中科院生物物理研究所 400038
目的:为了解RCS大鼠视网膜水平细胞在变性过程中的形态学改变,我们应用DiI标记及免疫组化的方法对RCS大鼠水平细胞进行了系统的研究,为进一步认识视网膜色素变性疾病的病理发展过程,视网膜重构的基础研究以及临床治疗研究提供了理论依据。
方法:以变性早中晚期的RCS大鼠及正常对照大鼠为研究对象。依照动物试验规程,取出视网膜制备铺片,用DiI晶体标记水平细胞。标记5天后,用激光共聚焦显微镜收集水平细胞图像,分析其形态特征,进行单边方差分析。部分视网膜冰冻切片后,进行rodopsin、recoverin、calbindin、neurofilament、calretinin、PKC-a抗体的组化染色,分析光感受器及相关细胞的变化。
结果:与对照组大鼠相比,RCS大鼠视网膜在P25时各种神经元细胞无明显的数量和形态改变。P45时光感受器的数量减少约50%,但水平细胞的树突与轴突的形态未见明显的改变。P60时光感受器数量减少80%以上,水平细胞的轴突终末细小分支丢失,树突及轴突野明显变小。P96时光感受器基本消失,视网膜水平细胞的树突与轴突野明显变小,细小分支丢失,仅残留一级与二级分支。
结论:RCS大鼠水平细胞的树突与轴突的形态在变性早期没有明显改变;变性中晚期形态有明显的改变,细小的终末分支丢失,树突及轴突野变小,但其在外网状层的分层仍基本保持正常。 |