乌兰 张晓梅 刘红玲
哈尔滨医科大学第一附属临床医学院 150001
目的:研究雷帕霉素(rapamycin,RAPA)对体外培养的兔晶状体上皮细胞(RLECs)增殖细胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen,PCNA)的影响。
方法:将体外培养的第 2~3 代的 RLECs 分别用 0.1 ng/ml、10 ng/ml 浓度的 RAPA 培养液,对照组使用 20%胎牛血清,培养 24 h、48 h 后,采用 Western-blottin 和免疫荧光方法检测用药组和对照组 PCNA 的表达,Western-blottin 的蛋白相对表达量(G)值用 Quantity One 软件分析,数据处理采用单因素方差分析(ANOVA)和 LSD–t 检验。
结果:Western blotting 检测的 PCNA 蛋白相对表达量(G)值为 1.08±0.08(对照组),0.85±0.05(0.1 ng/ml/24h 组),0.70±0.03(0.1 ng/ml/48h 组),0.64±0.07(10 ng/ml/24h 组)和 0.44±0.06(10 ng/ml/48h 组),药物组与对照组比较差异有统计学意义(P﹤0.01)。免疫荧光结果示在 0.1 ng/ml~10 ng/ml 浓度范围的 RAPA 作用 24 h~48 h,可抑制 RLECs 的 PCNA 表达。
结论:RAPA 具有抑制 RLECs 的 PCNA 表达的作用,并且抑制作用与浓度和时间正相关。从而为 RAPA 抑制后发性白内障的研究提供实验室依据。 |