摘要 目的建立兔角膜缘干细胞(LSCs)原代培养体系，了解年龄的增长对兔LSCs的ANp63蛋白表达的影响。
方法 选取3月龄、1．5年龄及3年龄新西兰白兔各10只，用含10％ 胎牛血清的DMEM／F12培养液对LSCs的细胞悬液进行体外原代培养。应用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)技术和间接免疫荧光法分别检测培养细胞中ANp63蛋白的表达量。 结果 接种3 d后大部分细胞贴壁，6 d左右形成良好的细胞单层，细胞呈圆形、椭圆形或多边形，类似角膜上皮细胞。年龄越大，ANp63的表达量越低。不同年龄组之间ANp63表达量的差异有统计学意义(P<0．05)。结论 含10％ 胎牛血清的DMEM／F12培养液能作为LSCs培养的基础液；ANp63蛋白的表达具有明显的年龄相关性，随年龄的增长ANp63表达量的下调可能是LSCs老化的分子机制之一。

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