摘要 目的研究脂质体介导增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因对体外培养的鼠视网膜Mailer细胞转染的有效性
及安全性。方法采用视网膜组织块法培养鼠视网膜Mtiller细胞，振荡法分离纯化细胞，并对其进行免疫细胞化学鉴定。用阳离子脂质体Lipofectamine 2000负载pEGFP—N1质粒转染Mailer细胞，荧光显微镜检测转染后12、24、48、72 h的转染效率。台盼蓝排斥实验检测转染和未转染细胞的活力，明确脂质体Lipofectamine 2000对Mtiller细胞的毒性作用。结果成功培养视网膜Mailer细胞，传代后90％ 以上的细胞呈神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色阳性。Lipofectamine2000介导质粒pEGFP—N1转染Mailer细胞后12、24、48、72 h的转染效率分别为(9．7±1．9)％ 、(18．1±16)％ 、(17．2±2．5)％ 、(16．9±1．7)％ 。台盼蓝排斥实验显示Lipofeetamine 2000转染前后活细胞率分别为(98．2,4-5．6)％ 、(96．1±6．2)％ 。结论脂质体Lipofectamine 2000可安全有效地介导Mailer细胞的转染，为进一步明确Mfiller细胞的病理、生理功能及靶向Mtiller细胞的基因治疗提供了新的手段。
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