摘要 目的 通过检测茄病镰刀菌刺激小鼠角膜基质细胞后Toll样受体4(TLR4)的表达分布，探讨TLR4在角膜
真菌感染中的作用。 方法体外培养小鼠角膜基质细胞，采用茄病镰刀菌液(孢子密度为1×10。CFU／mL)来刺激传3代的小鼠角膜基质细胞，于刺激0 h(即未刺激)以及3、6、12 h后应用免疫细胞化学染色、RT—PCR法测定各组细胞TLR4蛋白及mRNA的表达，ELISA法测定各组细胞上清液中肿瘤坏死因子d(TNF—oL)的分泌水平。 结果 培养的角膜基质细胞1周后融合，波形蛋白荧光染色阳性。TLR4蛋白及mRNA在未刺激角膜基质细胞呈微弱表达，3 h较前明显升高，6 h达到高峰，12 h开始减弱，但与0 h相比，差异均有统计学意义(蛋白：t =0．031，t =0．097，t =0．069，P<0．05；mRNA：t =0．367，t =0．422，t =0．078，P<0．05)。TNF．d分泌量随着刺激时间的延长呈上升趋势，6 h达到高峰，然后逐渐下降，3、6、12 h组与0 h组比较差异均有统计学意义(t h=21．152，t6 h=40．854，tl2h=27．713，P<0．05)。TLR4mRNA及蛋白的表达与TNF一 的分泌间均呈正相关(r=0．729，0．751，P<0．05)。结论TLR4可能在角膜识别真菌感染、介导炎性防御反应过程中起到重要的作用。
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