杨玲玲   周庆军   王瑶   谢立信

山东省眼科研究所   266071

目的：研究白色念珠菌对角膜基质细胞基质金属蛋白酶及细胞外基质成分表达的影响。

方法：体外培养人角膜基质细胞（HTK），待细胞长至融合后，换做无血清培养液，加入1×108/ml未灭活的白色念珠菌37℃分别作用0、0.5、1、2、4、8、16小时；或加入1×108/ml沸水浴灭活的白色念珠菌37℃作用0、2、8、24、48、72小时。提取各组细胞总RNA，反转为cDNA后，行real time PCR或RT-PCR检测不同基质金属蛋白酶（MMPs）、基质金属蛋白酶抑制剂TIMPs及细胞外基质成分的表达变化。

结果：与对照组相比，未灭活的白色念珠菌处理HTK 16小时后，MMP1、MMP2、MMP3、MMP9、MMP12的表达有不同程度的上调，分别增高了179%、37%、410%、23%及76%；而TIMP2的表达则显著下调，并呈时间依赖效应，到16小时下调达97.8%；而Collagen I、Biglycan、Decorin、Lumincan等细胞外基质成分在未灭活白色念珠菌作用16小时后分别下调了56%、35%、71%、66%。而经灭活的白色念珠菌处理后，角膜基质细胞MMPs、TIMP2及细胞外基质成分的表达均无显著变化。

结论：白色念珠菌可以通过上调角膜基质细胞中MMPs的表达，抑制TIMP2的表达；造成各细胞外基质组分表达的降低，从而导致角膜基质细胞外基质降解，促使真菌的侵入从而引起真菌性角膜炎。这些效应对于未灭活的白色念珠菌更为敏感，说明较之直接的接触作用，白色念珠菌分泌的可溶性细胞因子可能在其中发挥着更为重要的作用。