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3 讨论
我们着重观察了局部RPE清除术后相邻神经视网膜(尤其是感光细胞)和脉络膜血管的改变，发现RPE清除术后外核层变薄、脉络膜毛细血管萎缩，此病理改变与AMD部分病理改变相似[24]，可为下一步的自体RPE移植的实验研究提供了模型基础;同时，本实验在清除RPE细胞的同时，部分破坏了Bruch膜，但未完全穿透，使本模型也可以模拟CNV膜剥除术后的病理改变[5，6]。
3.1 RPE清除术后感光细胞的病理改变
我们发现RPE刷出后感光细胞损害速度明显快于AMD的自然病程和动物模型的病例进程。虽然AMD发病机制至今仍不清楚，但是从大量实验证据及模拟出AMD病理过程的动物模型上分析，AMD的发生可能与RPE细胞的某些功能受损或效率下降有关。本实验完全的清除了RPE细胞，所以有可能使病理进程大大加快。另外，我们不仅清除了RPE细胞，还清除了RPE细胞的基底膜，部分破坏了Bruch膜，暴露了Bruch膜的胶原层，Bruch膜的胶原层的主要成分是硫酸软骨素[7]，因为硫酸软骨素在中枢神经系统的损伤当中能够抑制神经元轴突的再生[8]，所以也可能是硫酸软骨素的暴露抑制感光细胞外节修复，因而本实验中感光细胞的变性死亡较以往的研究更为迅速而且严重。
3.2 RPE清除术后脉络膜循环的改变
从ICGA来看，本实验的动物模型在清除术后1h出现的脉络膜低荧光可能源于脉络膜的反应性血管收缩，这种交感神经支配的反射性血管收缩[9，10]在术后几小时甚至更短时间之内即应消失，但是我们在RPE刷除后7d仍然发现局部ICG充盈缺损，因此可以推测，在术后第7d才真正出现与脉络膜毛细血管萎缩无灌注有关的低荧光，在随后的各时间点观察中，可以看到这种无灌注的低荧光区持续存在，这个脉络膜毛细血管ICGA表现的变化时程符合RPE清除术后其他动物模型的病理改变[11，12]。但是，本实验中未出现脉络膜大中血管萎缩的情况。由此看出AMD患者出现的脉络膜的大中血管萎缩可能不是单纯由于RPE细胞损伤或变性而导致，可能是由于脉络膜灌注减少等其他原因引起。这个结果与Lena等文献报道的结果不同，在Lena的研究中发现RPE细胞清除术后不仅脉络膜毛细血管萎缩，脉络膜中大血管也出现萎缩的现象，他对这个结果解释是由于成纤维细胞阻塞脉络膜大血管而造成的[13]。与本实验不同的是，Lena在刷除RPE时，切除了其表面的神经视网膜，而本实验则保持了RPE清除区表面神经视网膜的完整。所以，Lena的实验中脉络膜血管的变化就不是来自于RPE损伤这个单因素。另外，ICG荧光波长835nm，毛细血管平均直径7～9μm，所以ICGA不能清晰的显示脉络膜毛细血管的情况，Miki等[14]文献曾应用ICGA的黄斑部脉络膜荧光强度与视乳头的亮度的灰度比来评价AMD患者脉络膜循环充盈减少的情况，但是本研究实验动物不能固视及很好的固定头位，而且从病理切片上看，本实验中脉络膜仅有毛细血管的萎缩，没有大中血管的萎缩，所以脉络膜的灌注减少不显著，如果应用这种方法分析将造成误差增加，所以我们仅采用病理切片的方法定性观察脉络膜血管的情况，未能定量分析RPE清除术后脉络膜血流的减少程度。
此外，在本实验动物模型中无1例CNV发生。这个结果部分证明了CNV的发生原因，与单纯的RPE损伤无关[15]，除了新生血管生成因子和抑制因子动态平衡的失调之外，还应有Bruch膜局部的缺损，而Bruch膜缺损更可能是来源于细胞外基质的降解。
总之，RPE细胞清除术后清除区周围的RPE细胞不能增殖移行覆盖损伤的Bruch膜，继发表面神经视网膜变性，感光细胞变性死亡，相邻脉络膜毛细血管萎缩。这些病程改变与AMD的病理过程相似。因此，此动物模型可用于观察RPE移植对感光细胞保护作用的研究，并可选择RPE刷除后的特定时间点，进行实验性RPE移植，观察植片的存活及其对感光细胞的挽救和保护效果。
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