(一)免疫学检测
1.一般检测
(1)血细胞计数及分类:感染免疫性疾病可引起血白细胞数增多,尤其是中性粒细胞增多;系统性红斑狼疮及免疫缺陷病者其中性粒细胞减少;嗜酸性粒细胞增多时,应考虑过敏性或特应性疾病。
(2)血小板计数:原发性免疫缺陷病常伴有血小板减少。器官移植排斥反应可出现血小板减少。
(3)红细沉降率(血沉、ESR):风湿、类风湿、自身免疫性疾病患者的血沉可加快。
(4)血钙测定:原发性免疫缺陷病常伴有低血钙。
(5)血型鉴定:某些免疫遗传性眼病可能与血型抗原有关,如原发性青光眼、老年性白内障等与血型相关。
(6)皮内试验:利用已知抗原或抗体行前臂内侧皮内注射,如体内存在特异性抗体或抗原,或致敏淋巴细胞即可发生免疫反应,局部皮肤红肿,或诱发全身症状。此属特异性免疫诊断方法。晶状体、角膜及视网膜抗原等均可作为诊断抗原。
(7)病理组织学检查:此为一种常规的病理学检查法,所有能获得病理组织的眼免疫病均可行组织病理学检查。常规的组织病理学检查步骤包括组织固定、石蜡或火棉胶包埋、脱蜡、染色等。
组织病理学检查对某些眼免疫病的诊断具有重要意义,如蚕蚀性角膜溃疡病变角膜和结膜组织中有淋巴细胞、中性白细胞、肥大细胞浸润等。交感性眼炎具有典型的病理组织学改变:淋巴细胞、浆细胞、单核细胞及类上皮细胞浸润,从而使脉络膜明显增厚。
2.体液免疫测定
病原微生物侵袭机体,刺激机体产生抗体,当抗原再次侵人机体,与相应抗体结合时,便可活化免疫细胞或释放免疫活性介质,产生溶菌、杀菌、中和病毒等功能,这就是机体产生的体液免疫功能。而在体外(玻片、试管),抗原与相应抗体结合时,便可出现凝集、沉淀等可见反应。因此,可用已知抗原检测体内未知抗体,或用已知抗体检测未知抗原,这些体液免疫检测将有助于某些免疫性眼病的诊断和鉴别诊断。
(1)抗原的制备:抗原分生物和非生物性抗原,一般要求由国家指定的生物制品单位统一供应,有条件的可自制,但必须经过严格的鉴定,保证质量。直接在人体注射检测者,一定要严格无菌操作,抗原效价要高,以避免假阴性和假阳性结果出现。临床上常用的抗原有晶状体抗原、视网膜抗原、脉络膜抗原、角膜抗原等生物性抗原。角膜可溶性抗原包括角膜上皮、基质及内皮抗原,可用甘氨酸法提取。此外尚有花粉、室内尘埃、塑料等非生物性抗原。
(2)抗体制备:制备血清或眼液抗体,要防止蛋白变性,力求新鲜,防止细菌污染。为了定量检测抗体,一般要做适当稀释。稀释的方法有多种。如几何级数法、算术级数法等。血清抗体制备较易,标本采集过程中的影响因素较少。泪液抗体制备常受各种因素影响,如泪液采集方法不同致使各家报道的结果不同。泪液采集方法包括棉珠吸取法、海绵吸取法、针头抽吸法、毛细管法、滤纸条法等。由于泪液量较少,采集时常用直接或间接刺激法以增加泪液分泌量,这样势必影响泪液的质量及抗体浓度。有学者比较了刺激与未刺激泪液免疫球蛋白含量的相关性:IgG呈中度相关,IgA呈高度相关。房水抗体制备常因房水量少不易采集而受限。而且采集时要求严格无菌操作,动作要稳准,避免损伤虹膜、晶状体等组织。
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