目的:研究程序控制降温仪自动化控制降温速度对保存兔角膜内皮细胞的影响。

    方法:兔角膜片首先经过冷冻预处理，预处理保存液由不同百分比的二甲基亚砜、蔗糖和胎牛血清三种成份配成四种不同浓度梯度的混合液，沿角巩膜缘外1~2mm穿透剪取角膜片，分别在上述四种保存液中分别预处理十分钟后移入程控降温仪中。然后调节程控降温仪设定两个阶段梯度降温，第一阶段分别采取7种不同的降温速度，第二阶段也采取了7种不同降温速度，共49种不同程序分别降温至-80℃最后放入液氮-196℃长期保存。保存一定时间后进行复苏，并通过联合染色检测保存后角膜内皮细胞的状态，以角膜片中央四个不同视野为标准计算内皮细胞的活性，最后通过统计学分析处理。

    结果:通过对比发现第一阶段降温速度为-2℃/min时第二阶段降温速度为-5℃/min时保存的角膜其内皮细胞比较理想，显微镜下可见细胞排列紧密，明显的红色六边形轮廓，可见个别蓝染的胞核，细胞没有脱失的现象，没有见到裸核。

    结论:程序控制降温仪能自动精确地控制降温速度，能优化选择最理想的降温条件，在深低温保存中具有良好的应用前景，因此可在长期保存组织材料尤其眼库中推广使用。