|
2 结 果
2.1 房水内细胞计数 葡萄膜炎组房水内的渗出细胞数目较对照组大幅度地升高，L-NAME即刻 (0 h)使用能显著减少炎性细胞的渗出(P＜0.05), 而 6 h治疗组则没有显著差异(表1)。
2.2 房水蛋白浓度 葡萄膜炎有大量的蛋白渗出于前房，L-NAME即刻(0 h)治疗明显降低了蛋白浓度，与葡萄膜炎组间差异有显著性(P＜0.05)，而6 h治疗组没有显著差异(表1)。
2.3 房水及玻璃体NO含量的改变 在正常对照组，仅有较低水平的NO，葡萄膜炎时明显升高，即刻(0 h)治疗显著降低NO的含量，6 h治疗组NO含量改变与葡萄膜炎组没有明显差异(表1)。
2.4 组织病理检查 葡萄膜炎组的前房有大量细胞渗出和蛋白凝聚成块，虹膜血管扩张充血，虹膜基质层和睫状体有大量的炎细胞浸润。L-NAME即刻(0 h)治疗组，虹膜充血水肿，表面有少量纤维蛋白及中性粒细胞聚集，虹膜基质及睫状体的炎性细胞浸润明显减轻，L-NAME6 h治疗组没有明显的改善。
表1 房水内细胞数目、蛋白浓度，房水与玻璃体内NO浓度及组织炎症程度结果
tab 1 The results of leukocyte number and protein concentration in aqueous humor, nitric oxide concentration
in aqueous and vitreous humors and histopathologic examination(n=12, ±s)
| Group |
Leukocyte
in AH (×109/L) |
Protein
in AH (ρB/g·L-1) |
NO in AH
(cB/μmol·L-1) |
NO in VH
(cB/μmol·L-1) |
The degree of
inflammation |
| Control |
0.002±0.001 |
0.462±0.276 |
34.362± 6.483 |
27.642± 6.163 |
0 |
| Uveitis |
9.048±1.685* |
25.359±5.435* |
238.624±40.536* |
215.367±38.716* |
3.85±0.15* |
| Treatment (0 h) |
1.839±1.027△△ |
5.417±1.541△△ |
61.687± 8.275△△ |
55.683± 7.475△△ |
1.50±0.47△△ |
| Treatment (6 h) |
9.672±1.966 |
19.593±4.847 |
216.362±25.138 |
186.392±23.162 |
3.63±0.36 |
*P＜0.05 vs control; △△P＜0.01 vs uveitis; aH: Aqueous humors; VH: Vitreous humors
3 讨 论
葡萄膜炎的发生发展是有多种炎症介质和细胞因子参与的过程。近来研究表明NO作为重要的信号分子和效应分子，参与炎症反应和免疫反应：(1) nO可作为信使分子激动cGMP，引起血管平滑肌舒张，血管通透性增加，白细胞和蛋白向血管外的渗出增加［3］。(2) nO能诱导被脂多糖激活的巨噬细胞和淋巴细胞产生 TNFα和 IL等炎症因子，促进炎症反应［4］。(3) nO可激活环氧化酶，使前列腺素的合成增加［5］。(4) nO可与炎症反应中产生的O2－相互作用形成过氧化硝基阴离子( ONOO－)，它不仅本身是一种强氧化剂，还可分解为多种毒性产物，一方面能引起细胞正常代谢通路和膜功能的破坏，导致血-房水屏障的结构完整性被破坏；另一方面能损伤 sOD和谷胱甘肽过氧化物酶等体内重要的抗氧化体系，加重了组织的损伤［6］。本研究结果显示葡萄膜炎房水及玻璃体中NO浓度明显升高，0 h使用L-NAME降低NO浓度的同时，房水内蛋白浓度、渗出细胞数目及组织炎症浸润程度等各项炎症指标明显减轻，说明NO能促进葡萄膜炎的发展。
NO是以 L-精氨酸为底物在一氧化氮合酶 (NOS)的催化下合成的， nOS主要分为cNOS和iNOS (inducibe NOS)，前者催化合成少量的NO，后者催化合成大量的NO［1］，L-NAME主要抑制 cNOS，比抑制 iNOS强100倍［7］。 iNOS活性在LPS注射后9 h达到高峰［8］。本实验结果显示6 h使用L-NAME没有明显降低NO含量，没能阻止葡萄膜炎的发展，可能与其对iNOS的抑制力较差有关。0 h使用L-NAME能抑制葡萄膜炎的发展，此时由iNOS催化合成大量NO的过程还没有开始，提示由cNOS催化合成的少量NO参与了早期葡萄膜炎的始动过程。总之，NO在葡萄膜炎中的作用机制可以推测为：由cNOS催化合成的少量NO使血管扩张，炎细胞渗出，渗出的中性粒细胞和单核巨噬细胞在LPS的刺激下，iNOS mRNA表达增强，iNOS活性升高并合成大量的NO，NO反过来刺激诱发中性粒细胞和单核巨噬细胞产生 tNFα和白介素等炎症因子［4］，并促进前列腺素等炎症介质的合成［5］，他们共同作用形成以后的炎症高峰。
葡萄膜炎的发生发展是多因素作用的复杂病理过程，本研究显示0 h使用L-NAME减轻了葡萄膜炎，但仍未恢复到对照组水平，说明其抑制了葡萄膜炎病理过程的某些方面，而不是所有环节。
参考文献
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［2］ Tilton RG, Chang K, Corbett JA, et al. Endotoxin-induced uveitis in the rat is attenuated by inhibition of nitric oxide production［J］. Invest ophthalmol Vis Sci, 1994,35(8):3278-3288.
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［8］ Mandai M, Yoshimura MN, Yoshida M, et al. The role of nitric oxide synthase in endotoxin-induced uveitis:effect of NG-nitro-L-arginine［J］. invest Ophthalmol Vis Sci, 1994,35(10):3673-3680. 上一页 [1] [2] |
