结果
组织学发现
A组(上皮切削组)在治疗后12小时观察到重新上皮化。在基质内观察到有少量多形核细胞和巨噬细胞。36小时后,上皮完全覆盖裸露的角膜切削区。1周后,在中央区角膜浅表基质内显示有轻微的细胞过度增生(图1,A和B)。
B组和C组(基质切削组)上皮愈合在术后24小时。在1周时,在中央区角膜浅层发生上皮过度增生,充满基质缺损区域,其方式与切削的深度有关(图1,C~F)。在这2组中,围绕或在切削区下方区域内观察到轻度浸润的多形核细胞和巨噬细胞。在一些病例中,有一些巨噬细胞粘附到角膜内皮、前房内和虹膜内。
图1 光学显微镜转换到角膜切削区。1小时角膜切削的深度(A、C和E)与后期时间点上皮增生的程度相一致(B和D:1周;F:36小时)(苏木精-伊红染色,放大倍率×200)
角膜内主要组织相容性复合物H2的表达
在浸润细胞和角膜内皮细胞内观察到主要的组织相容性复合物H2膜蛋白(OX6)的表达,在激光治疗后1小时检测到表达,并持续1周(图2)。观察到表达的峰值在治疗后36小时,并持续至少1周。
角膜内的炎性细胞
巨 噬 细 胞
本研究中,我们使用多种标记物以评估巨噬细胞的存在(表1)。虽然OX42、ED2和ED3通过巨噬细胞和Langerhans细胞所表达,OX62和ED1惟一被Langerhans细胞表达;从OX42和ED2阳性染色细胞中减去OX62和ED1阳性染色细胞才是巨噬细胞的真实数目。通常,占主导优势的表位是ED2阳性染色的巨噬细胞(图2)。在不同切削深度的各组中没有实质性的差异。
Langerhans细胞
Langerhans细胞的存在是通过2种免疫标记物进行评估:OX62和ED1(图2)。在激光治疗后12或24小时检测到低水平,并持续1周。
图2 在1周恢复期时,各种细胞标记物的表达。OX42+和ED+细胞是细胞浸润的主要类型。Langerhans细胞(OX62+和ED1+)出现,但在低水平。在不同切削深度的各组中没有明显的差异。切削深度如下:A组,上皮,40μm中央区切削;B组,浅层基质,40μm上皮和20μm基质切削;C组,深层基质,40μm上皮和40μm基质切削(h,小时;WK,周)
淋 巴 细 胞
T细胞的存在通过免疫标记物OX19和OX40进行评估。B淋巴细胞通过OX33标记物进行评估。T和B淋巴细胞在治疗后12~36小时偶而可见,并在准分子激光PRK后1周不能检测到。
内皮细胞反应
在全部治疗组,术后12和24小时观察到轻度的内皮细胞水肿。在上皮切削组,术后36小时内皮细胞的结构恢复正常,但是在基质切削区则不是。术后1周,内皮细胞已恢复为正常结构。
免疫组化染色显示在激光术后1小时可检测到在内皮细胞内有OX6表达,切削后12小时达到峰值,术后1周,在基质切削组中的一些眼内仍存在。
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