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氧化应力对晶状体一氧化氮和一氧化氮合酶活性影响

http://www.cnophol.com 2008-10-31 16:18:12 中华眼科在线

  2 结果

  2.1 人、兔、鼠眼NOS分布与NO水平

  收集急性交通事故死亡的人眼球5只(20~30岁),正常SD大鼠11只,新西兰兔6只测定NO水平及NOS活性。

表1 人、SD大鼠、兔眼NOS的分布及NO的水平(±s)

  Tab.1 The NO level and NOS activity of human,SD rat and rabbits(±s)

NOS U/mgpro. NO μmol/mgpro.
Lens(n) Vitreous body(n) Retina(n) Choroid(n) Lens(n) Vitreous  bodyRetina(n) Choroid(n)
Human 6.45±1.57(5) 0.46±0.41(3) 2.48±1.25(5) 2.87±1.15(5) Undetected Undetected 351.75±106.46(4) 208.15±133.1(4)
Rabbit 18.03±8.20(10) 0.73±0.37(4) 1.72±0.36(6) 126.65±67.12(8) Undetected 221.26±94.28(6)
SD rat 13.61±2.13(10)

3.70±1.72(10) —  52.79±20.79(10)  1315.1±345.30(6)

  表1结果显示晶状体NOS活性大于视网膜、脉络膜,而玻璃体最低,但人、兔眼NO水平晶状体、玻璃体全部测不出,而血管丰富的视网膜、脉络膜NO较高。此外种属间显示差异,SD大鼠晶状体NOS活性是人的两倍,为(52.8±20.8)μmol/mgpro.,SD大鼠视网膜NO是人的4倍。

  2.2 氧化应力与5种抗白内障药物影响温育晶状体的NOS活性和NO水平

  购40只纯种SD大鼠,体重120g±5g,活宰后将晶状体置入CO2培养箱内温育48h后,冰浴下制备匀浆上清,测定NOS,NO,MDA,结果见表2。

  表2结果提示对照组温育晶状体NOS活性为82.56±24.99 U/mgpro.,氧化组比对照组NOS活性上升52.5%(P<0.01),麝珠明目、益视安、晶福组NOS活性与氧化组相似,无显著差异,而海珠神组略低于氧化组,视明露组显著高于氧化组,是对照组的2.15倍(P<0.01)。提示氧化应力诱导NOS活性升高,视明露激活NOS更为明显,其激活的机制尚有待探讨。这5种抗白内障药物均有诱导NOS活化的作用,这种作用是药理的或是病理的尚不清楚。

表2 不同条件对温育晶状体NOS活性及NO水平的影响(±s)

  Tab.2 The effect of different condition on NOS activity

  and NO level in inocubated lenses(±s)

Group(No.) NOS U/mgpro.(n)  NO μmol/mgpro.(n)
Control group(1) 82.56±24.99(6) Undetected(4)
Oxidative group(2) 126.10±8.07(4) Undetected(4)
(2)+Hanzhushen1.0ml(3) 107.51±27.04(4) 196.79±277.31(3)
(2)+Shezhumingmu1.0ml(4) 114.17±6.82(4) 44.95±9.75(3)
(2)+Yishian1.0ml(5) 118.09±39.28(4) Undetected(4)
(2)+Jingfu1.0ml(6) 119.03±5.44(4) Undetected(4)
(2)+Shiminglu1.0ml(7) 177.91±28.44(4) 191.279(1)

  测得的NO水平各具特点,对照组晶状体4份匀浆(8个晶状体)全部未能测出NO,可能与NO的物理化学性质有关。NO既溶于水也溶于脂肪,可在细胞内外自由扩散,NO是自由基,性质活泼,半衰期极短,极易失活。本文证实人、兔眼晶状体匀浆上清全部测不出NO,可能与此有关。编号(2)~(7)各组温育介质均含有30%H2O2,FeCL3,过渡金属离子(FeCu)与H2O2的氧化还原反应产生OH+O2,而NO与O2作用成ONOO,继质子化后迅速分解成NO2和羟自由基,看来NO与氧自由基同时存在将产生更强的氧化应力。表2结果显示编号(2)~(7)都浸浴在氧自由基发生体系中,该体系理应测不出NO,但是海珠神组、麝珠明目组各有3份样本分别测出NO,为(196.79±277.31)、(44.95±9.75) μmol/mgpro.,视明露组也有1份测得NO为191.279 μmol/mgpro.。这提示这3种抗白内障药物具有保护NO不被淬灭的作用。

表3 不同条件对温育晶状体MDA水平的影响(n=4,±s)

  Tab.3 The effect of different condition on MDA

  level in inocubated lenses(n=4,±s)

Group(No.) MDA μmol/mg.pro. Suppressive(%)
Control group(1) 17.17±1.0  
Oxidative group(2) 22.69±2.5  
(2)+Haizhushen(3) 15.48±0.44 131
(2)+Yishian(4) 15.98±1.2 121
(2)+Jingfu(5) 16.14±0.49 118
(2)+Shezhumingmu(6) 16.18±1.71 118
(2)+Shiminglu(7) 16.64±0.59 109

  Suppressive(%)=(Oxidative-therapeutic)÷(Oxidative group-Control group)

  我们使用的氧化应力模型,促使被温育的晶状体LPO作用增强,与对照组相比MDA增高1.5倍,而添加抗白内障药物的5组MDA水平都比对照组低,抑制率超过100%,按抑制LPO作用强度排序依次是海珠神>益视安>晶福>麝珠明目>视明露,提示这些药物都是较强的抗氧化剂。

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(来源:互联网)(责编:duzhanhui)

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