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讨论
一、P53蛋白
倪?［3］报告眼睑恶性肿瘤中居前三位者分别是BCC、睑板腺癌、SCC 。肿瘤发生的确切病因目前尚不清楚，但大量的临床实验研究证实几乎所有人体恶性肿瘤均有作为遗传物质载体的染色体的异常。进一步的研究表明，致癌因素作用于细胞的遗传物质（主要是DNA），引起遗传密码的改变， 使某些关键的细胞控制基因突变或过量表达。而P53 基因突变被认为是目前所知人体肿瘤中最常见的基因改变[1]。肿瘤抑制基因P53位于人类17号染色体短臂（17P13.1）上，其编码产物相对分子质量为53×103的核内磷蛋白，分为两种类型：野生型P53（WTP53）和突变型P53（MTP53）。正常的即WTP53蛋白具有细胞生长抑制作用， 其功能是通过诱导抑制细胞增殖作用的基因转录实现[4]，其靶基因主要有WAF1/CIP1、GADD45、IGF-BP3、 Bax 及mdm2基因。如果DNA遭受损伤，P53蛋白积累，WAF1/CIP1 等不表达或只有极低表达，DNA复制停止，使其有足够的时间修复损伤的DNA，若修复失败，则诱导细胞凋亡,从而阻止有癌变倾向细胞的产生[5]。但如果P53基因发生突变，则生长抑制功能丧失，而致细胞增殖异常活跃，最终导致肿瘤的发生。正常细胞内仅产生很少量的P53蛋白，并很快降解，常规免疫组化方法很难检测到。突变后的P53蛋白构象发生改变，稳定性增加。半衰期延长达数小时以上，因而，常规免疫组化方法检测到的是发生突变的P53蛋白，P53基因突变与P53蛋白过表达间的高度一致性已被证实[6]。PCNA是真核细胞 DNA合成所必须的一种相对分子质量为36×103的核蛋白，是DNA多聚酶δ的辅助蛋白，是细胞DNA合成期必不可少的因子［7］。在静止细胞中PCNA含量很少，G1晚期开始增加，S期达到高峰，G2期、M期明显下降［8］。 因此认为PCNA可作为评价细胞增殖状态的重要指标。
二、P53蛋白表达与眼睑恶性肿瘤发生的关系
肿瘤的形成往往要经历一个漫长的演进过程，导致其恶性转化的机理目前仍不清楚。在皮肤肿瘤的动物实验中发现P53 基因突变出现在肿瘤发展的早期阶段，对肿瘤的恶性进展有重要作
用［9］；然而，不能肯定P53基因突变是肿瘤进展为恶性的先决条件。在我们的实验中发现，正常眼睑及轻度不典型眼睑上皮增生中未见P53蛋白表达，中、重度不典型眼睑上皮增生、 原位癌、浸润癌中P53阳性表达率逐渐增高，阳性染色程度也有增高趋势， 阳性染色细胞由散在分布于基底细胞层的中度不典型眼睑上皮增生发展到弥散分布于上皮全层并向周围组织浸润的浸润癌。推测P53 基因突变对于病变从良性进展为恶性起着重要的作用，与肿瘤的发生有关，认为P53 阳性染色的不典型增生、原位癌可能处于更不稳定的不良状态，更容易进展为浸润癌［9］。研究同时发现，正常上皮、轻、中、重度不典型眼睑上皮增生、原位癌、浸润癌的上皮细胞PCNA标记指数有增加趋势，PCNA阳性细胞分布范围及紊乱程度增加,提示PCNA表达在癌前病变的检测方面有一定的指导意义。
三、P53蛋白表达与眼睑恶性肿瘤的关系
我们对102例眼睑恶性肿瘤进行了P53蛋白的免疫组化检测，其中BCC 、SCC和睑板腺癌的P53蛋白阳性表达率分别是56.6%、50.0%、58.8% ， 表明P53基因突变与眼睑恶性肿瘤的发生有关。不同分化程度的SCC与P53 蛋白阳性表达程度密切相关（P＜0.05）。尽管在BCC及睑板腺癌中无明显相关性（P＞0.05），但在低分化癌组织中可见P53强阳性染色主要分布在++～+++，推测P53蛋白更易在较原始的幼稚细胞中堆积，提示检测P53蛋白的异常表达可作为眼睑恶性肿瘤分化程度的参考指标。因此，我们认为P53基因突变与眼睑恶性肿瘤的发生、发展密切相关，对肿瘤细胞的转化、增殖及恶性表型可能起到一定的促进作用。
四、在眼睑恶性肿瘤中P53蛋白表达与PCNA表达的关系
我们的研究结果显示眼睑恶性肿瘤PCNA表达与肿瘤分化程度明显相关（P＜0.05），分化越差，PCNA平均指数越高。关于眼睑恶性肿瘤中P53蛋白表达和PCNA之间的关系，文献未见报道。我们的研究结果显示P53阳性表达者，PI值均显著高于阴性表达者，二者密切相关(P＜0.05)；表明MTP53失去对细胞生长的抑制作用，导致细胞异常增殖，使G1～S期癌细胞增多，与Sasano
等[10]认为P53蛋白表达的肿瘤细胞大多数处于增殖周期中的观点一致。 肿瘤的分化程度越低，预后越差，在我们的实验中，发现PCNA与P53 蛋白过表达密切相关，因此，我们推测PCNA表达增强者其P53阳性细胞增殖旺盛，恶性程度高。
综上所述，P53基因突变与眼睑恶性肿瘤的发生密切相关，P53蛋白和PCNA可作为检测眼睑恶性肿瘤的标志，可能与肿瘤的恶性程度有关。我们采用免疫组化LSAB法及微波处理抗原恢复技术，方法简便、可靠，对于辅助病理诊断及判断临床预后有一定的参考价值。
参考文献
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[2] De Rosa G, Staibano S,Barra E,et al. P53 protein in aggressive and non-aggressive basal cell carcinoma. J Cutan Pathol, 1993,20 : 429-434.
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[6] Rodrigues NR , Rowan A , Smith ME, et al. P53 mutations in colorectal cancer. Proc Natl Acad Sci USA,1990, 87: 7555-7559.
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(收稿：1998-08-24 修回：1998-10-13) 上一页 [1] [2] [3] |
