眼视光学杂志 1999年第2期第1卷 近视眼研究
作者:高前应 高如尧 王培杰 郭延奎 卢佩勇 蒙艳春 朱涛 李力
单位:高前应 高如尧 卢佩勇 蒙艳春 朱涛 李力(山东省泰安解放军第88医院眼科 271000);王培杰(山东省泰安解放军第88医院病理科 271000);郭延奎(山东农业大学实验中心)
关键词:胰岛素;形觉剥夺;兔;近视;超声;病理学
摘 要 目的:探索实验性近视的发病机制,并观察胰岛素对近视形成的影响。方法:采用形觉剥夺方法,在幼兔眼建立近视动物模型。取7日龄幼兔52只,分A、B、C三组。A组20只,为单纯缝合;B组16只,为缝合眼睑+玻璃体内注射胰岛素;C组16只,为缝合眼睑+玻璃体内注射生理盐水。第60天用A超测量双眼的前房深度、晶体厚度、玻璃体腔长度和眼轴长度,并计算玻璃体腔长度/眼轴长度,同时进行病理学观察。结果:在三组中形觉剥夺能导致实验眼相对性近视,两眼的玻璃体腔长度、眼轴长度和玻璃体腔长度/眼轴长度间的差异均有高度显著的统计学意义(P<0.001),而前房深度和晶体厚度无明显统计学差异。病理学也有明显改变,巩膜胶原纤维变细,视网膜色素上皮层改变是最突出的变化。结论:形觉剥夺能导致眼球的轴性延长,使眼球的形态学和组织学发生改变,其中玻璃体腔延长、巩膜胶原纤维的变细、延长和视网膜色素上皮层改变起着非常重要的作用,而胰岛素不能阻止这些改变。
Effects of insulin on ocular optical parameters and histopathology of form deprived myopic rabbit
Gao Qianying,Gao Ruyao,Wang Peijie,et al. Department of Ophthalmology,No. 88 Army Hospital,Tai An 271000
Abstract Objective:To study the possible role of insulin in the development of myopia.Methods:52 seven-day rabbits,which were divided into three groups A,B and C and were monocularly deprived(MD) of pattern vision by suturation of right eyelids. In Group A,no drug was used. In Group B and C,animals received a series of intravitreal injection of insulin(n=16)or saline(n=16)in right eyes,whereas left eyes were employed as control. Anterior chamber depth(ACD),lenticular thickness(LT),vitreous chamber length(VCL)and axial length(AL)were determined for all eyes with A ultrsound on the 60th day,VCL/AL was calculated and histopathologic changes were also observed.Results:Form deprivation can induce relative myopia in all groups,and VCL、AL and VCL/AL,but not ACD and LT,were significantly different between experimental and control eyes. Moreover,obvious histopathologic changes were also found.Conclusion:Form deprivation can induce axial enlongment. Longer vitreous chamber、thinner scleral fibre and changes of the retinal pigment epithelium,which could not be prevented by insulin.
Keywords Insulin Formdeprivation Rabbit Myopia Ultrasound Pathology
形觉剥夺是近视形成的重要原因之一,许多国内外的研究者通过遮盖或缝合眼睑等方法制成动物如鸡[1]、猴[4]等的近视模型来研究近视的发病机制。笔者选用目前很少使用的兔作为实验动物,应用缝合眼睑方法制成形觉剥夺近视模型,用A超对眼球进行生物学测量,对眼球的重要成份进行组织病理学研究,并观察胰岛素对近视形成的影响,报道如下。
1 材料和方法
1.1 材料 选双眼屈光度大致相同的7日龄幼兔52只,分为A、B、C三组,由母兔母乳喂养。白天用自然光照射,光照与黑暗的周期比例为14∶10,室温控制在20℃。均以右眼为实验眼,左眼为对照眼。A组20只,为单纯缝合眼睑组;B组16只,为缝合眼睑+玻璃体内注射胰岛素;C组16只,为缝合眼睑+玻璃体内注射盐水。观察60天。
1.2 方法
1.2.1 眼睑缝合 在幼兔出生后第7天(刚睁眼)时,按50mg/kg盐酸氯胺酮溶液肌注麻醉后,用5-0丝线作“u”字缝合上下睑,使之密闭。随着幼兔的增长,眼睑可采用“双u”字缝合。
1.2.2 玻璃体内药物注射方法 麻醉同上,在外眦部距角膜缘3mm垂直巩膜壁向眼球中心方向进针,刺入约5mm,缓慢注入药液0.02ml,B、C两组每隔4天注射一次,共四次。B组为胰岛素注射液,C组为生理盐水。
1.2.3 屈光度测量 出生后第一周用带状光检影镜测量双眼屈光度,缝合右眼后每周测量左眼一次,第60天时拆开右眼缝线测量双眼屈光度。
1.2.4 眼球超声生物测量 在兔龄60天时,使用中国医学科学院研制的BME-200型眼科A/B超,根据作者提供的兔眼大体生理参数,厂方技术人员重新设计测量软件,测量兔眼的前房深度、晶体厚度、玻璃体腔长度、眼轴长度,并计算玻璃体腔长度/眼轴长度。测量前眼局部点1%地卡因3次,每只眼均测量3次,取其平均值。
1.2.5 标本制作 第60天时实验眼和对照眼各取2只作光镜和透射电镜检查。
①光镜标本:将眼球角膜缘后2mm穿刺切穿,以10%福尔马林固定24小时,取巩膜、睫状肌、脉络膜、视网膜作常规石蜡包埋、切片、HE染色、光镜观察。
②电镜标本:取巩膜、睫状体、视网膜作梯度乙醇脱水,Epon812树脂浸透、包埋。LKB超薄切片机切片,醋酸双氧铀柠檬酸铅双染色,JEM-1200EX透射电镜观察、拍照。
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