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硫酸镍与芪归解毒汤对人晶状体上皮细胞中HSP27表达影响

http://www.cnophol.com 2008-12-17 11:06:15 中华眼科在线

  3讨论
   
  热休克蛋白是细胞在环境温度升高或非生理条件下被诱导产生的蛋白质,由热休克基因所表达。HSP最初是从经历热刺激(从25℃ 移到30℃ ,30 min)的果蝇唾液腺中发现,故取名热休克蛋白[1]。以后发现有机体在经受其他刺激如缺血、缺氧、重金属等作用之后,细胞产生多种变化,最终影响蛋白质的结构和功能,并能诱导生成热休克蛋白,启动内源性保护机制。热休克蛋白的基本功能为帮助蛋白质的正确折叠、移位、维持及降解[4]。作为分子伴侣的HSP的主要功能有:1)帮助细胞内新生蛋白质的正确折叠[9];2)热休克后,恢复变性蛋白或加速其降解[10]。通过本实验,发现晶状体上皮细胞在应激之前HSP27有基础表达。Bagchi等[3]还发现HSP27存在于人眼晶状体全层,其作用可能是防止变性蛋白质进一步变性或积聚的作用。

  表1  HSP27和GADPH引物序列(略)

  图1  RTPCR电泳图 (略)

  1:正常对照组GADPH基因235bp;2:正常对照组HSP27基因413bp;3:镍损伤组GADPH基因;4:镍损伤组HSP27基因;5:镍损伤加中药保护组GADPH基因; 6:镍损伤加中药保护组HSP27基因; M分子质量Marker

  图2  HSP 27mRNA表达水平aP<0.05 vs镍损伤组(略)

  晶状体是人眼视觉系统的重要组成部分,本身无血管及神经供给,容易遭受各种刺激因子的损害,蛋白质发生变性,透明晶状体出现混浊,发生白内障。镍是现代工业及人们日常生活中广泛应用的一种金属,我国是产镍大国,从事采矿、选矿、冶炼、加工镍的职工已超过了10万人。对镍矿区员工的调查研究发现,镍矿区工作人员白内障的发病率远高于非接触人群,白内障晶状体中镍含量明显高于正常透明晶状体,硫酸镍对人眼晶状体上皮细胞的增殖具有明显的抑制作用,呈明显的剂量效应关系,并能诱导晶状体上皮细胞凋亡[6,7]。因此,探索如何防治镍接触人群白内障的发病是一项重要的工作。
   
  Cekic等[11]测量老年型白内障晶状体内微量元素含量,发现镍含量较对照组明显增高。Swanson[12]用不同年龄组的正常透明晶状体和白内障晶状体测量其微量元素镍的含量,结果显示镍在白内障晶状体中含量要比正常透明晶状体中的含量要高的多。Garcia等[13]在临床上发现一对镍接触性皮炎伴发白内障的姐妹。Heydenreich认为镍离子是白内障致病因子,对晶状体有破坏作用。Jacob等[14]发现,当Ca2+存在时,镍可增加K+、Na+的通透性,损害晶状体。张兴儒等[6]对国内最大的镍矿工业区的流行病学调查发现,镍作业人员晶状体浑浊检出率(53.5%)明显高于对照组(17.0%),差异有非常显著性(P< 0.01),且晶状体浑浊的程度也较对照组重。对晶状体中的镍含量对比测量分析,发现白内障晶状体中镍含量明显高于正常透明晶状体组,差异有显著性(P<0.05),直接接触镍矿的白内障晶状体中的镍含量明显高于镍矿区市民和上海市民的白内障晶状体中镍含量,差异有显著性(P<0.05),说明从事镍矿采矿、造矿、冶炼及加工中可能使人体晶状体中的镍含量增加,它可能是镍矿工人中晶状体浑浊增加的原因[15]。
   
  芪归解毒汤是由黄芪、当归、土茯苓、连翘、郁金、丹参、菊花、枸杞子按一定的比例配制而成,是在防治镍毒性的方剂扶正解毒汤[16]的基础上结合眼部的具体特征和白内障发病特点而得出。针对白内障的发病特点:以虚(肝肾亏虚、脾气虚弱)为本,以实(肝热上扰)为标[17]。采取以补益肝肾养血以固本,利湿化淤解毒治其标,标本兼顾的原则研制而成。方中黄芪、当归扶助正气,补益气血,气血双补;土茯苓、连翘利湿解毒;佐以丹参,郁金活血通络;菊花、枸杞子明目解毒。全方标本兼治,共奏补益肝肾气血、化淤利湿解毒之功。本研究结果证实,硫酸镍损伤可造成晶状体上皮细胞HSP27表达的增强,提示HSP27可能在重金属损伤过程中对晶状体变性蛋白起保护作用,给予中药药物血清干预后能够提高HSP27的表达,并可能通过提高HSP27的表达保护晶状体。

   【参考文献】

   1 Pelham H. Heat shock protein: coming in from the cold. Nature1988;332:776777

  2 Lippa S. Kajanne R, Arminen L, et al. Differentiation induction of HSP70encoding genes in human kematopoietic cell.J Biochem2001;276:3171331719

  3 Bagchi M, Katar M, Maisel H, et al. Effect of exogenous stress on the tissuecultured mouse lens epithelial cells. J Cell Biochem2002;86:302306

  4周星利,元泽峰,李凌,等.热休克蛋白与白内障发生的研究进展.国际眼科杂志2008;8(4):788790

  5饶惠英,姚克,汤霞靖,等.大鼠顿挫性眼外伤动物模型中晶状体上皮细胞热休克蛋白70和27的表达及其6热耐受的调节作用.中华眼科杂志2006;42(3):241242

  6张兴儒,王佩秋,郭根来.镍钴作业对人眼损伤的初步研究.眼科1993;2(4):226231

  7张兴儒,王佩秋,郭根来,等.镍钴作业人员晶状体混浊调查研究.眼外伤职业眼病杂志1997;19(3):8487

  8贾丹,张兴儒,张隆,等.硫酸镍对正常人眼晶状体上皮细胞抑制作用的研究.眼科研究2008;26(6):455457

  9 Bukan B, Dewerling E, Pfund C, et al. Getting newly synthesized proteins into shape. Cell2000;101:119122

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(来源:互联网)(责编:duzhanhui)

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