3讨论

    VIP是由28个氨基酸残基组成的多肽，在眼内有广泛分布，结膜、小梁网、虹膜、脉络膜、巩膜、视网膜都有VIP表达，葡萄膜存在大量VIP神经纤维，即虹膜、睫状体、睫状突、视网膜及脉络膜都存在VIP神经纤维[1]。有学者认为VIP作为一种重要的近视信使可能在视网膜水平对近视眼后部巩膜主动重塑起重要的调控作用[2]。bFGF属于多功能成纤维细胞生长因子家族，作为近视信使的一种，有很多研究都表明采用结膜下或玻璃体腔注射外源性bFGF可显著抑制FDM所导致的眼轴延长[3,4]。Rohrer等[5]对bFGF高亲和力和低亲和力受体的定位发现，通过自分泌或旁分泌，几乎所用的视网膜细胞都有bFGF和其高亲和力受体表达。在突触层（内从状层和外从状层），有高、低亲和力受体的共同结合位点，信号传导需通过高、低亲和力受体及bFGF组成的三重复合体，这种共同性结合位点位于较窄的突触层面正是高亲和力受体功能维持的基础。在视网膜中VIP通过无长突细胞分泌，因此在内丛状层有丰富的VIP能无长突细胞突触分布，然而这个部位也正是高、低亲和力受体共同结合位点丰富的层面，bFGF可能通过影响生长调节通路无长突细胞的突触传递活性及效率来调控多种神经递质，也可被这些细胞所调控，这种共同的作用可能影响着眼球的生长。本研究就是以bFGF对FDM眼中VIP表达的影响作为切入点，探讨bFGF和VIP这两种近视信使可能存在相互作用。我们发现，VIP在光感受器外节有较强表达，这一表达部位与一氧化氮合酶（iNOS）在视网膜外层的表达部位相似[6]，通常表达VIP受体的细胞90％显示有神经源性iNOS的定位[7]。bFGF可诱导视网膜色素上皮细胞生成iNOS，通过对一氧化氮生成的调节，部分参与光感

    图 2 眼球后壁组织VIP PCR产物15g/L琼脂糖凝胶电泳图 1：自身对照眼；2：对照组遮盖眼；3～5:实验组1,2,4ng遮盖眼

    受器的信号转换[8]。根据研究结果，外源性bFGF可能诱导iNOS生成，通过一氧化氮生成影响VIP受体活性，从而调节VIP的表达，参与光感受器的信号转换，当然这种推测还有待进一步证实，但是由于光感受器外节是近视信使作用的重要部位，因此这种推测也存在部分理论基础。由于视网膜中VIP通过无长突细胞分泌，所以在无长突细胞分布的内核层和内丛状层会出现较强VIP表达，这与我们的实验结果吻合。

    由于视网膜VIP的表达依赖于光条件，在FDM大白鼠中可发现，FDM 50d后，VIP细胞数大约减少30％，回到正常视觉环境，VIP免疫活性可完全恢复[9]；在亮环境喂养的鼠，VIP表达可上调，而在暗环境喂养的鼠，几乎无法检测到VIP[10]。本实验中由于未遮盖眼接受了正常光的刺激，所以VIP mRNA表达会比对照组要高。接受bFGF玻璃体腔注射的FDM眼VIP表达虽然较未遮盖眼要低，但是随着剂量的加大，VIP表达上调，这种作用存在剂量依赖性，在高剂量组可发现VIP表达与未遮盖眼相比已没有差异，bFGF可拮抗FDM对VIP免疫活性的抑制，这种现象可能的解释为大量的外源性bFGF进入玻璃体内，通过扩散作用，到达视网膜，与所有位于内丛状层的高亲和力受体结合，组成高、低亲和力及bFGF三重复合体，复合体可通过与VIP能无长突细胞突触进行信号传导，对VIP的分泌正性上调，VIP生成增加。VIP上调可能影响视网膜内层信息传递回路，通过复杂的视网膜－脉络膜－巩膜调控机制，诱导相关信使最终作用于巩膜，导致巩膜主动重塑，因此根据本实验结果，推测VIP可能与bFGF对眼球生长作用起着相拮抗的作用。VIP和bFGF作为近视信使中的两种，它们之间的关系并不能解释整个近视的复杂的网络调控机制，因此深入了解各种近视信使之间的相互作用，是否存在协同或抑制作用，将有助于阐明近视的发病机制，并找到其有效的治疗手段。在今后的研究工作中，应结合分子生物学等基础医学的先进实验技术，重于探讨哺乳类和灵长类动物实验性近视发生发展中各种近视信使的作用，摸索部分近视治疗药物的可行性。　

   【参考文献】

1 Samuelsson-Almen M, Nilsson SF. Pituiatary adenylate cyclase- activating polypeptide- and VIP-induced activation of adenylate cyclase in the porcine non-pigmented ciliary epithelium: effect of antagonists. J Ocul Pharmacol Ther ,1999; 15(5): 389-400

2 Stone RA, Laties AM, Raviola E, Wiesel TN. Increase in retinal vasoactive intestinal polypeptide after eyelid fusion in primates. Proc Natl Acad Sci USA ,1988;85(1):257-260

3 Rohrer B, Stell WK. Basic fibroblast growth factor (bFGF) and transforming growth factor beta (TGF-beta) act as stop and go signals to modulate postnatal ocular growth in the chick. Exp Eye Res ,1994;58(5):553-561

4蒋晶晶,刘双珍,王华,吴小影,谭星平,夏朝华.外源性碱性成纤维细胞生长因子对鸡形觉剥夺性近视眼的调控.国际眼科杂志,2005;5(5):936-938

5 Rohrer B, Tao J, Stell WK. Basic fibroblast growth factor, its high- and low-affinity receptors, and their relationship to form- eprivation myopia in the chick. Neuroscience ,1997;79(3):775-787

6朱玉广,刘双珍,吴小影,李凤云,闵晓珊,许惠卓. TGFβ1、iNOS在鸡FDM的表达及作用.中国实用眼科杂志，2004;22(1):48-52

7 Bergua A, Mayer B, Neuhuber WL. Nitrergic and VIPergic neurons in the choroids and ciliary ganglion of the duck Anis carina. Anat Embryol (Berl) ,1996;193(3):239-248

8 Goureau O, Lepoivre M, Becquet F, Courtois Y. Differential regulation of inducible nitric oxide synthase by fibroblast growth factor and transforming growth factor-β in bovine retinal pigmented epithelial cells: inverse correlation with cellular proliferation. Proc Natl Acad Sci USA ,1993;90:4276-4280

9 Herbst H, Their P. Different effects of visual deprivation on vasoactive intestinal polypeptide(VIP)-containing cells in the retinas of juvenile and adult rats. Exp Brain Res ,1996;111(3):345-355

10 Ferguson TA, Fletcher S, Herndon J. Neuropeptides modulate immune deviation induced via the anterior chamber of the eye. J Immunol ,1995;155(4):1746-1756

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