2结果

    2.1翼状胬肉成纤维细胞的生长 与对照组相比，Ln组成纤维细胞数量少，分布稀疏；胞质浓缩，反光较强，颗粒明显（图1A，B）；第3~7d，Ln组细胞增殖明显受抑制（P <0.05），尤以3~5d差异更为显著（P <0.01，图2）。

    2.2翼状胬肉成纤维细胞α-SMA的表达 α-SMA在对照组表达良好；在Ln组翼状胬肉成纤维细胞稀疏，α-SMA在细胞内的表达减弱（dapi复染细胞核）（图3A，B）。

    2.3翼状胬肉成纤维细胞TGF-β1和cytokeratin mRNA 的表达 Ln组TGF-β1 mRNA的表达下降，cytokeratin mRNA的表达增加（图4）。

    3讨论

    原发性翼状胬肉术后复发率高，诱因是手术创伤及术后炎症反应，使胬肉组织残留的成纤维细胞和血管细胞活化，以及细胞外基质蛋白的沉积，导致纤维血管组织形成[1]。这种成纤维细胞的病理性增生及新生血管纤维化的程度和范围是预测翼状胬肉切除术后复发的可靠的形态学指标[2]。目前的治疗多采用羊膜移植或联合角膜缘干细胞移植，抑制炎症和新生血管，抑制纤维化[3]。我们采用层黏连蛋白包被的方法培养翼状胬肉中的成纤维细胞，把包被蛋白作为眼表上皮基底膜的替代物[4]，目的是为病变组织中的成纤维细胞提供健康的上皮下基质环境，减弱细胞的增殖，从而减轻纤维血管组织聚集，减少疤痕形成。从实验的结果可以看出，在使用层黏连蛋白组，成纤维细胞胞质浓缩，颗粒明显，细胞生长曲线整体降低，成纤维细胞的增殖明显受到抑制；α-SMA在对照组增殖旺盛的成纤维细胞的胞质内表达良好，而在层黏连蛋白处理组则表达明显减弱。α-SMA是组织纤维化的一个重要指标，在增殖旺盛的纤维组织中表达丰富。翼状胬肉成纤维细胞在经过层黏连蛋白处理后，不仅表现出增值活性的减弱、细胞数量的减少，同时α-SMA表达的减弱也标志着其组织纤维化趋势的减弱。

    羊膜本身可以复杂地表达多种生长因子，促进上皮形成，如碱性成纤维细胞生长因子和β-转化生长因子[5]。这些生长因子可以调控基质成纤维细胞[6]、角膜上皮细胞[7]的增殖和分化[8]。而层黏连蛋白作为羊膜主要的基质成分，在本实验中对翼状胬肉成纤维细胞的增殖起到了明显的抑制作用，使其生长曲线下移。研究表明，羊膜能够抑制β1-转化生长因子(TGF-β1)的表达[9]；本实验证实，层黏连蛋白可以使翼状胬肉成纤维细胞TGF-β1 mRNA的表达下调，而TGF-β1是一种在伤口愈合过程中调整成纤维细胞活性的纤维生长原型细胞因子，这可能是层黏连蛋白抑制翼状胬肉成纤维细胞的增殖，进而消除炎症及瘢痕化、重建正常上皮表型的一个重要原因。

   【参考文献】

1 Liu DJ, Chen XM, Bao J, Pan RG, Li M, Liu YL. Effects of extensive Tenon's membrane excision combined with mitomycin C treatment in the pterygium surgery. Int J Ophthalmol (Guoji Yanke Zazhi) ,2006;6 (3):700-701

2 Tan DT, Chee SP, Dear KB, Lim AS. Effect of pterygium morphology on pterygium recurrence in a controlled trial comparing conjunctival auto-grafting with bare sclera excision. Arch Ophthalmol,1997;115:1235-1240

3 Onwasigwe EN, Ezegwui IR. An overview of management of pterygium in Nigeria. Int J Ophthalmol (Guoji Yanke Zazhi) ,2006;6(3):552-554

4 Olivero DK, Furcht LT. Type Ⅳcollagen, laminin, and fibronectin promote the adhesion and migration of rabbit lens epithelial cells in vitro . Invest Ophthalmol Vis Sci ,1993;34:2825-2834

5 Kria L, Ohira A, Amemiya T. Growth factors in cultured pterygium fibroblasts: immunohistochemical and ELISA analysis. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol ,1998;236(9):702-708

6 Shimazaki J, Yang HY, Tsubora K. Amniotic membrane transplantation for ocular surface reconstruction in patients with chermical and thermal burns. Ophthalmology ,1997;104(12):2068-2076

7 Shimazaki J, Shinozaki N, Tsubota K. Transplantation of amniotic membrane and limbal autograft for patients with recurrent pterygium associated with symblepharon. Br J Ophthalmol ,1998;82(3):235-240

8 Zhang LW, Xi XH. Advance in microbiological researches on the mechanism of pterygium. Int J Ophthalmol (Guoji Yanke Zazhi) ,2006;6(6):1404-1406

9 Ma X, Li D, Tseng SCG. Cytokire pression by human corneal and limbal fibroblasts is modulated by amniotic membrane. Invest Ophthalmol Vis Sci ,1997;38(4):S512

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