基础             2315                                      PO0149

    内质网应激参与视网膜脱离后视功能损伤机制的研究

    刘海洋 孙晓东 汪枫桦 许迅 张娴 张皙

    上海交通大学附属第一人民医院眼科  200080

    目的 检测内质网应激凋亡途径标志物GRP78、GADD153在大鼠视网膜脱离后不同时期的表达情况，探讨内质网应激凋亡途径在视网脱离后细胞破坏、视功能损伤中的作用及机制。

    方法 向Wistar大鼠视网膜下注射0.1%透明质酸钠制造视网膜脱离模型。分别在网脱后1/2天、1天、2天、4天、8天、16天、32天收集大鼠眼球及视网膜组织。用TUNEL方法检测不同时期视网膜细胞的凋亡情况；用半定量RT-PCR的方法检测视网膜组织中GRP78mRNA、GADD153mRNA的表达；用western印迹的方法检测视网膜组织中两种标志物蛋白水平的表达；用免疫荧光及激光共聚焦显微镜技术观察两种蛋白在视网膜各层细胞的分布。

    结果 造成大鼠视网膜脱离模型后，网脱维持超过30天；网脱后1/2天视网膜出现凋亡细胞，到2-4天达高峰，8天后显著减少，凋亡主要集中在外核层，也有少量出现于内核层与神经节细胞层；GRP78mRNA在1/2天、1天、2天、4天高于未网脱组（P<0.05），GRP78蛋白1/2天、1天、2天、4天、8天、16天、32天均高于未网脱组（P<0.05）；GADD153mRNA1/2天、1天、2天、4天高于未网脱组(P<0.05); GADD153蛋白1/2天、1天、2天、4天高于未网脱组(P<0.05)；GRP78蛋白在外核层、内核层、神经节细胞层的胞浆中表达，在外核层最多。GADD153蛋白主要在外核层的胞核中表达，内核层、神经节细胞层有少量表达。

    结论 内质网应激凋亡途经启动了视网膜脱离后细胞的凋亡，同时通过上调一些分子伴侣（如GRP78）的表达来保护视网膜；为我们通过干预视网膜脱离后的细胞凋亡，提高网脱病人的视功能，提供了新的理论依据和新的靶点。

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