基础             2649                                      PO0157

    胚胎和生后大鼠视网膜干细胞在体内和体外的分化差异

    柯碧莲  许 迅   顾  青  黄建南   张  皙

    上海交通大学附属第一人民医院眼科 200080

    目的 研究胚胎和生后大鼠视网膜干细胞在体内和体外的分化异同。

    方法  取胚胎18d和生后2wSD大鼠视网膜，分别用悬浮法及贴壁法培养。传至第一代后转入分别含10ng•ml-1CNTF、20ng•ml-1EGF、10ng•ml-1bFGF、10%视黄酸、10％胎牛血清的DMEM：F12中进行诱导分化，贴壁后2、3、5、6d的细胞及胚胎18d，生后1、3、5、7、14d的大鼠视网膜切片分别行nestin、Vimentin、Opsin及GFAP的二步法免疫组织化学染色。

    结果  大鼠的RPCs在悬浮时呈球状生长，nestin染色阳性，悬浮培养传至一代，贴壁培养传至五代。CNTF、b FGF、EGF及视黄酸组在培养至6d时可呈神经元样细胞改变，有轴突，但持续出现nestin阳性。生后2w的RPCs无法诱导成opsin阳性细胞。

    结论  RPCs可在体外培养并传代，其在分化过程中形态学的改变先于功能学。光感受器细胞的体外诱导比较困难。

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