青光眼             1168                                      PO0453

　　重组人促红细胞生成素对大鼠慢性高眼压视网膜神经元损伤的保护作用

　　高莉茉 段宣初 胡妙妙 李丹

　　中南大学湘雅二医院眼科 410011

　　目的：探讨慢性高眼压损伤后SD大鼠视网膜神经节细胞层（retinal ganglion cell layer,RGCL）中促红细胞生成素受体(erythropoietin receptor,EPOR)表达的改变，以及玻璃体内注射重组人促红细胞生成素（recombinant human erythropoietin， rHuEPO）对慢性高眼压所致的大鼠视网膜神经元损伤的保护作用及其可能的作用机制。

　　方法：采用532nm激光烧灼SD大鼠角巩膜缘浅层静脉，制作大鼠慢性高眼压模型。同时采用Tonopen笔式眼压计测量大鼠眼压。SD大鼠随机分为四组，损伤组、DMSO组、rHuEPO组和rHuEPO联合Wortmannin(WM，磷脂酰肌醇－3激酶抑制剂)组，均以右眼为实验眼，以损伤组左眼为正常对照眼。用免疫组织化学法观察各组RGCL中EPOR，蛋白激酶B(protein kinase B,AKT),磷酸化蛋白激酶B（phosphorylated AKT，PAKT）的表达变化。通过末端脱氧核酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记法（TUNEL）检测RGCL中神经细胞的凋亡。

　　结果：①正常SD大鼠的RGCL中有EPOR表达；慢性高眼压损伤后大鼠RGCL中EPOR表达明显增加，与正常组比较差异具有统计学意义（p﹤0.05）。②玻璃体内注射rHuEPO后，模型大鼠RGCL中凋亡细胞数目较损伤组和DMSO组明显减少，差异具有统计学意义（p﹤0.05）。③与损伤组和DMSO组比较，rHuEPO组尽管RGCL中AKT的表达无明显改变，但PAKT的表达明显增加，TUNEL染色阳性的凋亡神经细胞数目较少，差异具有统计学意义（p﹤0.05）；而联合注射WM后，PAKT表达较单独注射rHuEPO组明显减少，TUNEL染色阳性的凋亡神经细胞数目较多，差异有统计学意义（p﹤0.05）。

　　结论： 532nm激光烧灼大鼠角巩膜缘3/4周浅层静脉能成功制作大鼠慢性高眼压模型。慢性持续的眼压升高可导致大鼠内层视网膜厚度明显变薄。①正常SD大鼠视网膜RGCL中有EPOR的表达，慢性高眼压损伤后大鼠RGCL中EPOR表达明显增加。②玻璃体内注射rHuEPO后，RGCL神经元的凋亡细胞数目减少，说明rHuEPO对慢性高眼压模型RGCL神经元损伤具有保护作用。③玻璃体内注射rHuEPO后，RGCL中PAKT的表达明显增加，其增加可被PI3K抑制剂阻断，说明rHuEPO的视神经保护作用可能通过PI3K/AKT信号转导途径。

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