青光眼             1086                                      PO0449

　　重组人白细胞介素-2对慢性高眼压模型大鼠视网膜神经元保护作用的研究

　　胡妙妙,段宣初,高莉茉,唐罗生

　　中南大学湘雅二医院眼科 410011

　　目的 建立大鼠慢性高眼压模型，探讨慢性高眼压对SD(Sprague-Dawley)大鼠视网膜形态及视网膜神经节细胞（RGCL，retinal ganglion cells layer）神经元密度影响。探讨重组人白细胞介素2（recombinant human interleukin-2, rhIL-2）对SD大鼠慢性高眼压视神经损伤的保护作用。

　　方法 采用532nm激光烧灼SD大鼠角巩膜缘浅层静脉，阻断房水回流的方法建立大鼠慢性高眼压模型。用Tonopen眼压计测量正常大鼠的眼压。24只SD大鼠随机分为正常对照组、安慰剂(生理盐水)组、溴莫尼定（阿法根）治疗对照组和rhIL-2治疗组4组。正常对照组不作任何处理；其余3组建立慢性高眼压模型，模型建立一周后，分别腹腔注射生理盐水、溴莫尼定及rhIL-2。用TUNEL染色法检测各组大鼠RGCs层神经元的凋亡情况。用免疫组织化学染色法和图象分析的方法检测各组大鼠RGCs层神经元表达Bcl-2抗原的变化。
　　
　　结果 正常SD大鼠白天眼压界于7mmHg~ 20mmHg之间，平均眼压值为12.62±0.28mmHg。532nm激光烧灼阻断大鼠角巩膜缘3/4周巩膜浅层静脉，模型制作后第一天右眼眼压上升明显，平均达63.67mmHg；造模后一周眼压稍有下降，平均达58.75mmHg，4周之后趋于平稳，维持在40mmHg左右，HE染色可见大鼠右眼视网膜神经节细胞数与其左眼比较，差异有统计学意义。慢性高眼压组大鼠药物干预后第4周，正常对照组大鼠RGCL神经元TUNEL染色阳性的平均光密度值(mean optical density，MOD)最低（0.31±0.02)）；慢性高眼压模型组MOD显著上升(p<0.01)，其中腹腔注射rhIL-2（0.50±0.04）及溴莫尼定（0.60±0.04）的大鼠MDO较安慰剂组（生理盐水组）（0.80±0.16）低(p<0.01)，而腹腔注射rhIL-2的慢性高眼压模型大鼠MOD与其他慢性高眼压模型组相比为最低(p<0.01)。正常组大鼠RGCs层神经元对bcl-2抗原的表达较少（0.43±0.03）；慢性高眼压模型中安慰剂组、溴莫尼定治疗对照组及rhIL-2治疗组RGCs层神经元的胞浆或胞核上可见有阳性细胞表达；其中安慰剂组MOD（0.34±0.03）明显小于溴莫尼定组（0.57±0.03），而rhIL-2组（0.73±0.03）最高，(p<0.01)。

　　结论：

　　1. 正常大鼠基础眼压为7~20mmHg，平均眼压为12.62±0.28mmHg。

　　2. Tonopen眼压计能用于测量SD大鼠的眼压。

　　3. 采用532nm激光烧灼大鼠角巩膜缘浅层巩膜静脉可成功建立稳定的大鼠慢性高眼压模型，具有持续时间长、建立方便、并发症少的优点。

　　4. 光镜下观察HE染色的RGCL神经元的密度变化可以评估大鼠慢性高眼压模型RGCL神经元的损伤程度。

　　5. rhIL-2能够抑制慢性高眼压RGCL神经元的凋亡，起到保护 RGCL神经元 的作用。

　　6. rhIL-2通过诱导RGCL神经元的bcl-2 表达水平的增高, 引起自体免疫反应达到保护神经元的作用。

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