2结果

　　2.1 FG标记RGC的观察 B3组（制模后给予5g/L MT1mL/kg ip治疗30d）荧光显微镜下，RGC形态多样，大小不一，呈金黄色，边界清楚，荧光均匀，细胞外无荧光染料渗漏。视网膜血管表现为自视盘发出的放射状暗影，血管走行区内无标记细胞(图1A)。局部放大，可见RGC近端的轴突和树突(图1B)。A3组（制模后给予溶媒（100mL/L无水乙醇生理盐水）1mL/kg ip治疗30d）金黄色的RGC数目明显少于B3组(图1C)。

　　图1 A-C，大鼠视网膜铺片

　　2.2 RGC计数与RGC标识率 我们可以看到，随大鼠RIR后存活时间的延长，A组大鼠RGC标识率逐渐降低。A1组RGC标识率与A2, A3组分别比较，差异有显著意义（LSD检验，P <0.05, 表1,2），A2组RGC标识率与A3组比较，差异有显著意义（LSD检验P <0.05）。而随RIR后存活时间的延长，B组大鼠RGC标识率改变不明显。B1组RGC标识率与B2, B3组分别比较，差异均无显著意义（LSD检验，P >0.05），B2组RGC标识率与B3组比较，差异无显著意义（LSD检验，P >0.05）。A1组大鼠RGC标识率与B1组比较，差异无显著意义（LSD检验，P >0.05），A2, A3组RGC标识率分别与B2, B3组比较，差异有显著意义（LSD检验，P <0.05）。

　　3讨论

　　褪黑素（MT）是松果体分泌的一种具有广泛生理和药理作用的神经内分泌激素，药理研究表明, 它可调节生理节律，增强机体免疫力，可通过清除自由基和抑制一氧化氮合成酶（NOS）抑制细胞凋亡[9]。Mason[10], 李岩等[11]临床研究显示MT可抑制神经细胞凋亡，对老年性痴呆症或帕金森病有治疗价值。陈敏等[12]研究表明, MT可减少肾RIR中细胞凋亡的发生。明章银等[2]研究发现MT可抗心肌RIR后细胞凋亡。本研究结果显示，A组大鼠RIR后随着时间的延长RGC标识率逐渐降低，组间统计学分析均有显著差异（LSD检验，P<0.05），说明RIR后视神经节细胞呈进行性凋亡过程。而B组大鼠经MT治疗, RGC标识率降低不明显，组间统计学分析均无显著差异（LSD检验， P >0.05），尤其是RIR后14, 30d的B2, B3组较A2, A3组有显著差异（LSD检验，P<0.05），说明MT可抑制大鼠RIR后的RGC凋亡。细胞凋亡是一个诸多因素调控的程序性细胞死亡过程，推测MT可能是利用其强大的抗氧化能力清除了视网膜在RIR中产生的自由基，并增强机体抗氧化防御系统来双重保护RGC,从而达到保护视神经的目的。

　　【参考文献】

　　1杨楠,莫冬红,刘业滋.家兔视网膜缺血-再灌注损伤后形态学的动态变化.眼科新进展,2000;20(3):191-193

　　2 Siu AW, Ortiz GG, Benitez-king G, To CH, Reiter RJ. Effects of melatonin on the nitric oxide treated retina. Br J Ophthalmol ,2004; 88(8):1078-1081

　　3明章银,向继洲,吴基良,蒋建刚,欧阳昌汉.褪黑素对大鼠心肌缺血再灌注后细胞调亡的影响.华中科技大学学报(医学版),2003;32:358-360

　　4 Selles-Navarro I, Villegas-Perez MP, Salvador-Silva M, Ruiz-Gómez JM, Vidal-Sanz M. Retinal ganglion cell death after different transient periods of pressure-induced ischemia and survival intervals. A quantitative in vivo study. Invest Ophthalmol Vis Sci ,1996;37(10): 2002-2014

　　5凌士奇,丁正平,吕源淑.大鼠视网膜缺血再灌注损伤中的细胞调亡.眼科, 2003;12: 47-50

　　6黄厚斌,张卯年,马志中.改良视网膜节细胞逆行标记方法的建立.眼科新进展,2004;24(5):341-344

　　7黄蔚,黄萍,惠延年.荧光金逆行标记大鼠视网膜节细胞.中华眼底病杂志,1999;15(3):178

　　8马科,徐亮.视网膜定向铺片方法.眼科, 2002;11:238-239

　　9孙斌,冯星,肖志辉,张瑞宣.褪黑素与细胞凋亡.临床儿科杂志,2003;21(11):743-745

　　10 Mason RP, Leeds PR, Jacob RF, Hough CJ, Zhang KG, Mason PE, Chuang DM. Inhibition of excessive neuronal apoptosis by the calcium antagonist amlodipine and antioxidants in cerebellar Granule cell. J Neurochem ,1999;72(4):1448-1456

　　11李岩,陈俊抛,朱俭,陆青,王为.雌激素及褪黑素对β-淀粉样蛋白诱导的大鼠海马的神经损害的影响.中华神经科杂志,2002; 35(2): 123

　　12陈敏,郭仁寿,陈重义,张龙江,许家琪,余立平.褪黑素在急性肾缺血再灌注损伤中的防治作用及其对细胞调亡的影响.肾脏病与透析肾移植杂志,1999;8(1):27-30

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