2结果

    2.1大体观察 实验组和对照组无明显差异：所有实验眼于术后6h后出现少量房水闪辉，术后24～48h最严重，以后逐渐减轻。3～5d个别出现角膜后KP，几乎所有动物均发生角膜轻度混浊和切口部位局部水肿。

    2.2角膜内皮定量观察 术后实验组和对照组角膜内皮细胞面积增大，术后12～24h内皮细胞面积达到最大值，以后随着内皮细胞的修复逐渐减小，但术后168h仍然不能达到术前水平。术后实验组和对照组的角膜内皮细胞变异系数增大,术后12～24h变异系数增大最明显，此后逐渐减小，术后168h仍然大于术前。术后实验组和对照组的内皮细胞的密度减小，术后12～24h达最低谷，以后逐渐增大，但术后168h仍不能达到术前的密度。术前实验组和对照组角膜内皮细胞面积，变异系数和内皮细胞密度差异没有统计学意义；术后即刻,术后6,12h角膜内皮细胞平均面积，变异系数和内皮细胞密度差异有统计学意义 (P <0.05)；术后24h，角膜内皮细胞计数，变异系数的差异有显著统计学意义(P <0.01)；术后72h内皮细胞密度差异有统计学意义(P <0.05)；术后168h角膜内皮细胞平均面积，变异系数和内皮细胞密度,差异没有统计学意义 （P >0.05）。整个修复过程中实验组的内皮细胞面积小于对照组，变异系数小于对照组，内皮细胞密度大于对照组。显而易见，实验组的内皮细胞修复比对照组快，说明DECB可以促进内皮细胞的修复（图1A,B,C）。

    图1 超声乳化术后角膜内皮细胞平均面积、变异系数和细胞密度 A:平均细胞密度比较；B:内皮细胞变异系数比较；C:内皮细胞密度比较

    2.3透射电镜观察结果 术后6h：线粒体轻度肿胀，细胞器结构清晰，胞膜、核膜完整（图2）。术后24h：实验组胞膜完整，核膜完整清晰，可见细胞器；对照组胞膜破坏，细胞与内界膜之间可见缝隙，胞质内可见大空泡，细胞器结构不清晰（图3）。术后3d：实验组细胞器肿胀，微绒毛较多，胞质染色均匀，与内界膜连接紧密，细胞连接紧密。对照组内皮细胞与内界膜之间出现缝隙，细胞连接不紧密，线粒体肿胀溶解，胞质内空泡较多（图4）。

    3讨论

    DECB是从幼牛静脉血、胎肝、胸腺中经纯化、提取、超滤等工艺制成的去蛋白小分子制剂,其主要成分为无机离子( K+ ，Cl - ，Na + ，Ca2 + ，Mg2 + ，Fe2 + ，Zn2 + 等) 以及氨基酸、小分子肽(分子量小于5 000D) 、核苷酸、低聚糖、脂类等小分子有机物[1]。在组织细胞受损致缺血缺氧状态下, 组织细胞内的葡萄糖发生无氧酵解, 会产生大量乳酸, 进而导致细胞丧失功能最终死亡。小牛血去蛋白提取物可促进组织细胞对氧和葡萄糖的摄取与利用, 使葡萄糖由无氧酵解向有氧氧化转化, 在有氧氧化的状态下不仅ATP 的合成增加, 而且代谢的最终产物为对组织细胞无害的二氧化碳和水, 从而改善了细胞的能量代谢和功能状态, 延长了组织细胞在缺氧状态下存活的时间[2-4]。

    小牛血去蛋白提取物与损伤修复相关的报道最早出现于1957年，以后将其用于治疗各种慢性溃疡性疾病，并取得了一定疗效。1980年代后国内外文献陆续报告小牛血去蛋白提取物作为细胞修复药物，广泛应用于外伤、营养、炎症性角膜疾患取得满意效果。近几年对它进行了较深入的研究，证明该药在治疗角膜、结膜病中具有良好的疗效。目前国内外已经将小牛血去蛋白提取物应用于神经细胞，心肌细胞，肺上皮细胞、支气管细胞和角膜内皮细胞等组织的修复等组织的修复，并取得了较好的疗效。素高捷疗是小牛血去蛋白提取物外加防腐剂，赋形剂制成的一种新型眼药膏，它能促进细胞代谢，改善细胞对氧的利用与营养吸收，目前已广泛应用于眼科疾患、口腔溃疡、皮肤溃疡、脑部疾患等[5-8]。素高捷疗作为细胞修复药物应用眼科促进角膜上皮的修复已无可非议[9]。角膜内皮细胞也属于上皮细胞，素高捷疗不但可以促进角膜上皮细胞的修复，也可以加速角膜内皮细胞的修复，使细胞形态规则和细胞数量增加[10,11]。

    小牛血去蛋白作为细胞修复药物，仍然没有将其作为白内障术中冲洗剂和留置剂的报道。鉴于以上的理论和实践基础，我们致力于研究将小牛血去蛋白提取物作为白内障超声乳化摘除术术中冲洗剂和术后留置剂，观察其对术后角膜内皮细胞修复的干预作用。本次实验结果表明：宏观角度，小牛血去蛋白提取物促进了细胞水肿的减轻，内皮细胞六边形形态的恢复和密度的增加；微观角度，促进线粒体对氧的吸收和利用，使细胞器结构损伤相对轻微，形态相对规则。小牛血去蛋白提取物不但可以作为眼药膏促进角膜内皮细胞和内皮细胞的修复，还可以作为内眼手术，特别是白内障超声乳化术摘除术中的冲洗剂和术后留置剂促进内皮细胞损伤的修复。

    基金项目：中国辽宁省科技计划项目（No.2005225003）

    【参考文献】

    1于鸿儒,肖建英,刘用璋,张敬国,张尤新,王铁.小牛血去蛋白提取物的生化性质及药效学的实验研究.药物生物技术,1998;5(1):34-37

    2 Obermaier－Kusser B, Muhlbacher C, Mushack J, Seffer E, Ermel B, Machicao F, Schmidt F, Haring HU. Further evidence for a two－step model of glucose－transport regulation. Inositol phosphate－oligo－saccharides regulate glucose－carrier activity. Biochem J ,1989;261(3):699-705

    3 Hoyer S, Betz K. Elimination of the delayed postischemic energy deficit in cerebral cortex and hippocampus of aged rats with a dried , deproteinized blood extract（Actovegin）. Arch Gerontol Geriatr ,1989;9:181-192

    4 Groot H, Brecht M, Machicao F. Evidence for a factor protective against hypoxic liver parenchymal cell injury in a protein - free blood extract. Res Commun Chem Pathol Pharmacol ,1990;68 (1):125-128

    5杨育红,娄凤霞.小牛血去蛋白提取物注射液对培养的心肌细胞缺氧再给氧损伤的保护作用.中国临床药理学与治疗学,2004;9(4):434-436

    6方印生,邓秋杭.小牛血去蛋白治疗急性脑梗死30例疗效观察.现代医药卫生,2005;21(2):155-156

    7陈炯.素高捷疗冻膏治疗面部度烧伤创面疗效观察.浙江医学,2000;22(2):125

    8钱忠秀,周萍,胡长丕,陈振德.素高捷疗的临床应用.医药导报.2001;20(1):61

    9徐国兴,林发森,韩晓丽,何青,陈红.素高捷疗眼膏治疗角膜病的疗效观察.中国实用眼科杂志,1994;12（8）:491-492

    10吴玲玲.素高捷疗眼膏治疗白内障术后并发症的临床体会.江西医药,1999;34:242-243

    11李永平,唐祝华,李永强,冯官光,林健贤,方海洲,周守山,易玉珍.碱性成纤维细胞生长因子促进角膜碱烧伤内皮修复的实验研究.眼外伤职业病杂志,1999;21(6):523-525

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