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2结果
2.1视神经的超微结构 正常视神经电镜下可见到大量有髓神经的横切面，其中央为轴突，轴突内可见丝状的神经原纤维及线粒体，线粒体圆形或椭圆形。轴突外包有髓鞘，髓鞘的电子密度较高，为明暗相间的同心圆板层结构(图1)。模型组视神经位于髓鞘中央的轴突多数明显肿胀，体积增大，其内结构溶解，神经原纤维及线粒体消失，髓鞘成为空壳样结构，其板层结构消失。使用rhEPO的1wk后髓鞘结构基本正常，个别轴突仍有轻度肿胀，轴突内含有轻度肿胀的线粒体及神经原纤维，髓鞘的板层结构基本正常。
2.2视网膜节细胞的超微结构 正常视网膜的神经节细胞体积较大，呈圆形或多角形，细胞核较大，略圆，核内染色质分布均匀，常可见到明显的核仁。细胞质内有丰富的粗面内质网及多聚核糖体，线粒体数量较多，其形状为圆形或杆状，核周常可见到高尔基复合体及其周围的小泡，偶可见到脂褐素颗粒(图2)。模型组视网膜神经节细胞体积较正常组略小，细胞周围的Müller细胞的突起溶解、消失，形成许多空泡。细胞核膜迂曲，核内染色质凝集且边集，部分核膜缺失。细胞质内线粒体明显肿胀，嵴溶解、消失，线粒体成空腔，粗面内质网呈池样扩张，多聚核糖体及高尔基复合体消失，细胞结构空旷。使用rhEPO的1wk后神经节细胞体积较大，细胞核形状不规则，核内染色质分布均匀，核仁明显。细胞质内细胞器丰富，线粒体轻度肿胀，嵴短小，可见到高尔基复合体及脂褐素颗粒。
3讨论
目前青光眼的治疗主要是降眼压，但是单纯降眼压并不能阻止视功能的继续损害。随着视神经保护理论的提出和研究，视神经保护治疗越来越受到人们广泛的关注。视网膜神经节细胞死亡是青光眼视神经损伤的最终共同通路，阻断视神经损伤通路和增强视神经存活机制的方法即为视神经保护。视神经保护在青光眼的防治中非常重要。目前这一研究领域主要包括抗凋亡途径、EPO、谷氨酸拮抗剂、钙离子拮抗剂、一氧化氮合酶抑制剂、神经营养因子、自身保护性免疫等药物方面。视神经保护将会成为一种重要的青光眼辅助治疗措施之一。
EPO不仅在肾脏分泌，而且在肝脏、大脑、子宫等多个器官被发现。EPO及其受体广泛分布于人类多种组织中，亦存在于胎儿脑组织的整个发育过程中，并在成人脑中仍然存在。人类EPO（包括rhEPO）含有165个氨基酸，分子量为34.4kDa，其中60%是蛋白质（单个多肽链），40%为糖类，有3个N端糖链和1个O端糖链，并有两个双硫键连接。EPO通过促进红细胞生存、增殖及分化来调节红细胞生成。EPO及其受体调节或功能异常时产生病理状态如红细胞增多或新生儿贫血显示了这种因子的重要性。EPO目前主要用于各种贫血的治疗如自身免疫性疾病伴发贫血、骨髓增生异常综合征、再生障碍性贫血、单纯红细胞再生障碍性贫血、慢性髓系白血病、特发性骨髓纤维化、溶血性贫血、造血干细胞移植后等。十余年的临床使用表明rhEPO疗效好、安全性高、副作用少，是一种抗贫血的重要药物。但近年来的研究提示EPO可能成为一种新的神经保护剂[13]。研究表明当培养的神经元或者神经干细胞缺氧时加入超生理浓度的EPO（5U/mL）可以保护神经元免受损伤[4]。对培养的海马及大脑皮层神经元预先给予生理浓度的重组EPO处理8h或更久可以预防N甲基D天冬氨酸为中介的谷氨酸导致的神经坏死[5]。
EPO作为中枢神经系统一种具有潜在神经保护剂作用的神经递质，虽然在脑缺血再灌注损伤中作用的研究较多，但其在抗视网膜缺血损伤中的作用目前国内外研究较少。EPO对视神经组织保护作用方面的研究较少。许多青光眼患者在眼压得到良好控制的情况下仍然会视力逐渐下降以及视野缺损逐渐加重，这主要与视网膜和视神经的缺血缺氧有关系。视网膜和视神经的缺血缺氧可以导致兴奋性氨基酸以及氧自由基等毒性产物的增多，这些毒性产物进一步引起视功能损害。EPO能够刺激红细胞增生，增加红细胞数量，增加视网膜和视神经的氧的供给。研究表明全身应用rhEPO可以保护视网膜神经元抵抗急性缺血再灌注损伤[6]。rhEPO必须与其受体结合才能发挥其生理作用。体内研究[7]表明急性高眼压所致的缺血视网膜上有广泛的EPO受体的表达，中和EPO受体则加剧视网膜缺血性损伤。本研究结果显示，视网膜缺血再灌注可以引起视神经和视网膜节细胞超微结构的显著损害，全身应用rhEPO后超微结构的这种损害得到明显改善，结果说明rhEPO具有视神经保护的作用。rhEPO对视神经保护作用的机制如何目前不清楚。rhEPO属于大分子物质，理论上它不能通过血脑屏障以及血眼屏障，因此推测rhEPO与其受体结合后通过主动转运的方式穿过这些屏障最终起到神经保护作用。研究显示EPO通过上调BclxL基因的表达发挥其脑神经保护作用[4]。也有研究表明它可抑制组织内过量的一氧化氮[8]。EPO神经保护作用很可能是通过多种机制的共同调节而实现的[9]。EPO作为一种可能的新的神经保护剂，其受体、信号转导机制及其表达调节等仍需进一步研究。
【参考文献】
1周卓妍,宋燕燕,林兴会, 等. 联合应用促红细胞生成素和粒细胞集落刺激因子对早产鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用. 实用儿科临床杂志2008；23（6）: 425 427
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3郭燕,王万辉. 促红细胞生成素对急性高眼压大鼠视网膜的保护作用.国际眼科杂志 2007; 7(3): 688 691
4 Wen TC, Sadamoto Y, Tanaka J, et al. Erythropoietin protects neurons against chemical hypoxia and cerebral ischemic injury by upregulating BclxL expression. J Neurosci Res 2002;67(6):795803
5 Morishita E, Masuda S, Nagao M, et al. Erythropoietin receptor is expressed in rat hippocampal and cerebral cortical neurons, and erythropoietin prevents in vitro glutamateinduced neuronal death. Neuroscience 1997;76(1):105116
6 Junk AK, Mammis A, Savitz SI, et al. Erythropoietin administration protects retinal neurons from acute ischemiareperfusion injury. Proc Natl Acad Sci USA2002;99(16):1065910664
7 Sakanaka M, Wen TC, Matsuda S, et al. In vivo evidence that eryth ropoietin protects neurons from ischemic damage. Proc Natl Acad Sci USA1998;95(8):4635 4640
8 Calapai G, Marciano MC, Corica F, et al. Erythropoietin protects against brainischemic injury by inhibition of nitric oxide formation. Eur J Pharmacol 2000;401(3):349356
9 Genc S, Koroglu TF, Genc K. Erythropoietin and the nervous system. Brain Res2004;1000(12):1931 上一页 [1] [2] |
