林浩添   张振平   余秋蓉   晏丕松   汪琪璘   柏凌

中山大学中山眼科中心//眼科学国家重点实验室   510060

目的：探索HIV1 gp120蛋白侵犯人血视网膜屏障的机制。

方法：原代培养3种人血视网膜屏障细胞，用MTT法观察7种不同浓度的HIV1gp120蛋白作用24h和0.08 mg/L HIV1 gp120作用不同时间对3种屏障细胞的生长抑制作用。用流式细胞仪检测HIV1 gp120蛋白作用24 h后对3种细胞凋亡率和线粒体膜电位（ΔΨm）的影响；用Western免疫印迹检测Cleaved caspase9蛋白的活化情况；用透射电镜观察经0.08 mg/L HIV gp120蛋白处理24 h前后3种细胞超微结构的变化。

结果：HIV1 gp120蛋白作用24h，低浓度对3种细胞的活性均没有明显影响，而当浓度超过0.08 mg/L时，对细胞的增殖活性有明显的抑制作用，呈明显的浓度依赖性。HIV-1 gp120蛋白（0.08 mg/L）作用12h即可显著抑制细胞的增殖活性，24、48和72h抑制效应更明显，呈时间依赖性。HIV gp120蛋白作用24h后与对照组相比，各浓度组3种细胞凋亡率增加、ΔΨm明显降低以及Cleaved caspase9蛋白表达增强，均呈浓度依赖性。透射电镜示0.08 mg/L HIVgp120蛋白处理24h后，3种细胞均出现了线粒体肿胀、溶酶体增多等早期凋亡的微观改变。

结论：HIV1 gp120蛋白能够抑制人血视网膜屏障细胞的增殖并具有诱导凋亡的作用，破坏线粒体的结构和功能是其可能的机制。