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图 1 10 mW·cm-2组的凋亡细胞
图 2 30 mW·cm-2组的凋亡细胞
图 3 60 mW·cm-2组的凋亡细胞
图 4 加硒组的凋亡细胞
3 讨论
视网膜位于眼球壁最内层，主要功能是接受外界刺激，通过光化学作用转化为生理刺激，传到视觉中枢而产生视觉. 目前，微波对视网膜损伤的报道较少，有学者用微波诱导眼内短时高温,4 wk后进行病理检查,发现43 ℃时,可见视网膜色素上皮细胞及视网膜外节的损伤,色素颗粒移行,45 ℃可见视网膜结构的破坏,细胞萎缩,47℃可见明显的胶质反应［3］. 我们在本实验中以视网膜神经细胞为研究对象，观察了微波诱发细胞凋亡作用，用TUNEL试剂盒检测细胞凋亡，具有较高的灵敏度，而激光共聚焦显微镜具有很高的分辨率，图像清晰，并可排除焦点以外的荧光干扰，而且可在毫不损失分辨率的情况下测定标本的荧光强度，两者结合使用，可使实验数据更充分可靠，本实验结果目前尚未见文献报道. 研究表明，10 mW·cm-2微波辐照后即可见凋亡的视网膜神经细胞，30 mW·cm-2及60 mW·cm-2微波辐照后，培养液温度明显升高，细胞存活率下降，凋亡细胞数量明显增多，荧光强度增大，变化程度随微波辐照强度增大而增加. 可见，在本实验条件下，微波辐照可诱发视网膜神经细胞凋亡，凋亡细胞数量随微波辐照强度增大而增加. 微波可引起体内的氧化和抗氧化系统失衡［4］，而氧化产生的自由基可引发细胞凋亡［5］，因而微波诱发细胞凋亡可能与自由基产生过多有关. 硒作为人体必需的微量元素之一，参与GSH-Px的合成，具有抗氧化损伤作用. 机体缺硒可明显降低抗氧化能力，而适当的补硒可提高机体的抗氧化能力. 研究表明，微量亚硒酸钠与晶体上皮细胞孵育可减轻羟自由基对细胞的DNA损伤，提高细胞的抗氧化能力［6］. 硒还对电离辐射诱发的中国仓鼠卵巢细胞凋亡具有拮抗作用，其机制可能是通过清除电离辐射产生的活性氧而抑制细胞凋亡［7］. 本实验结果表明，培养液加硒后辐照，凋亡细胞数量明显减少，荧光强度减弱. 因而硒可能是一种有效的抑制自由基和ROS所诱发细胞凋亡的抑制剂，在微波对视网膜损伤的防护中具有潜在的应用价值.
作者简介：刘学东（1971- ），男（汉族），河北省涿州市人. 硕士(导师龚书明)，助教. Tel.（029）3374866 [email protected]
刘学东（第四军医大学预防医学系军队卫生学教研室，陕西 西安 710033）
龚书明（第四军医大学预防医学系军队卫生学教研室，陕西 西安 710033）
杨瑞华（第四军医大学预防医学系军队卫生学教研室，陕西 西安 710033）
陈景元（第四军医大学预防医学系军队卫生学教研室，陕西 西安 710033）
邓中荣（第四军医大学预防医学系军队卫生学教研室，陕西 西安 710033）
刘秀红（第四军医大学预防医学系军队卫生学教研室，陕西 西安 710033）·
参考文献:
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眼外伤与职业性眼病杂志, 1999;21(1):77-78．
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