程茗   贺翔鸽

第三军医大学大坪医院眼科   400042

目的：检测Nogo-66蛋白疫苗接种正常大鼠后抗体和脾细胞因子水平的变化，探讨其免疫活性。

方法：30只正常成年SD大鼠随机分为Nogo66弗氏佐剂疫苗组（疫苗组）、弗氏佐剂对照组（佐剂组）、PBS对照组（PBS组），每组10只。分别于双后肢皮下注射100μg/300μl Nogo66蛋白弗氏佐剂疫苗或相应对照300μl，每2周1次，共接种3次。初次免疫后每2周采集各组大鼠尾静脉血，酶联免疫吸附法检测血清IgG抗体滴度。分离培养大鼠脾细胞，调细胞浓度为5×106/ml。Nogo66或ConA刺激培养，用酶联免疫吸附法检测脾细胞培养上清IL-2、IFN-γ、IL-4的水平。采用SPSS11.0软件进行分析。

结果：初次接种4周后，疫苗组血清抗体水平开始升高，至第8周时达最高，显著高于其他组，第12周时未见明显下降；蛋白组于第4周开始抗体水平开始升高，升高幅度较疫苗组低，第8周时不再升高，此后维持在较低水平；佐剂组与PBS组血清抗体滴度升高均不明显。IL-2、IFN-γ、IL-4水平均随免疫剂量的增加有增高的趋势。ConA刺激组中疫苗组、佐剂组和PBS组IL-2、IFN-γ、IL-4水平均为正常的3倍左右，且相互无显著差异(P>0.05)。Nogo66刺激组中疫苗组大鼠脾细胞IL-2、IFN-γ、IL-4浓度显著高于佐剂组和PBS组，最高水平分别为40.4±14.9 pg/ml、75.3±14.6 pg/ml、47.5±18.5 pg/ml；疫苗组三种细胞因子水平较正常的增高倍数亦显著高于PBS组和佐剂对照组，其中IL-2、IFN-γ较正常增高约8倍，IL-4较正常增高约4倍，二者有显著差异（P<0.05）。

结论：Nogo-66蛋白疫苗接种大鼠后，可诱导较高的IgG抗体滴度水平，刺激脾细胞分泌免疫细胞因子，产生Th1类细胞免疫反应为主的免疫效应。