作者：遇颖，杨明，张庆生，刘英伟，刘海峰，姚鹏，宋晗，滕岩 作者单位：哈尔滨医科大学附属第四医院眼科，黑龙江 哈尔滨 150001；哈尔滨医科大学附属第一医院眼二科，黑龙江 哈尔滨 150001；唐山市眼科医院，河北 唐山 063000；牡丹江红旗医院一分院眼病中心，黑龙江 牡丹江 157000；黑龙江省医院，黑龙江 哈尔滨 150000
【摘要】 目的：通过观察糖尿病大鼠视网膜病理改变及葛根素对其影响，探讨葛根素对糖尿病视网膜病变的防治作用。方法：取Wistar雄性大鼠60只，腹腔注射STZ建立糖尿病大鼠模型，随机分为正常组、糖尿病组及糖尿病葛根素治疗组。葛根素治疗组大鼠给予葛根素100mg/kg·d腹腔注射。分别于1个月，3个月，5个月处死后采用HE检测方法，动态观察了不同病程的糖尿病大鼠视网膜病变的变化。结果：糖尿病大鼠视网膜HE染色不仅可见神经节细胞减少，而且内外颗粒层平均细胞光密度降低，细胞排列紊乱稀疏。糖尿病葛根素治疗组大鼠视网膜神经节细胞和颗粒层细胞明显增多，视网膜结构明显好转。结论：糖尿病性视网膜病变早期即有明显病理改变，葛根素对糖尿病性视网膜病变有防治作用。
【关键词】 糖尿病视网膜病变；HE；葛根素
糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy，DR）是糖尿病最为常见和严重的微血管并发症之一［1］。葛根素是中药葛根有效成份中的主要成份，葛根素注射液对糖尿病性视网膜病变的基础研究表明葛根素能有效抑制视网膜新生血管形成。我们将探讨葛根素对糖尿病大鼠视网膜病理改变的影响。
1 材料和方法
1.1 试剂和仪器
链脲菌素(STZ，Sigma公司产品)、葛根素（Puerarin，沈阳格林制药有限公司）、血糖仪、解剖显微镜、光学显微镜等。
1.2 方法
健康清洁型Wistar雄性大鼠60只（哈尔滨医科大学附属第一临床医学院动物中心提供），满10周龄（视网膜已发育成熟），体重约250g。随机取10只作为正常对照组，50只造模组。全部大鼠适应性喂养一周后，禁食水12h。造模组大鼠用链脲佐菌素（STZ）溶于新配制的0.01mol/L，pH4.6的枸橼酸钠缓冲液，按60mg/kg一次性左下腹腔内注射建立糖尿病大鼠模型。正常对照组大鼠用等量的枸橼酸钠缓冲液行腹腔内注射。72h后在大鼠尾静脉采血，用血糖仪检测血糖浓度，凡空腹血糖浓度≥16.7mmol/L，尿量及饮水量均明显增多者视为造模成功。模型建立成功后，随机分为糖尿病组（20只）和葛根素治疗组（20只）。葛根素治疗组大鼠给于葛根素注射液（Puerarin，沈阳格林制药有限公司）100mg/kg·d腹腔注射治疗。再按照不同时间段各分为1月、3月、5月组（每组5只大鼠，10只眼）。分别于1月、3月、5月用过量戊巴比妥钠麻醉处死大鼠，迅速摘除眼球制作视网膜石蜡标本并做HE染色，在光镜下分析结果。
2 结果
2.1 对照组视网膜变化情况
见图1。
图1 对照组视网膜各层细胞排列整齐,细胞形态正常(1×630)（略）
2.2 糖尿病1月组鼠视网膜变化的情况
见图2。
2.3 糖尿病1月葛根素组视网膜变化情况
见图3。
图2 视网膜内、外颗粒层细胞稀疏，排列稍紊乱，内外颗粒层界线不清楚，内外网状层可见空泡(1×630)（略）
图3 视网膜各层细胞排列整齐,细胞形态正常，各层分界清楚，未见空泡形成(1×630)（略）
2.4 糖尿病3月组鼠视网膜变化的情况
见图4。
图4 视网膜节细胞层及内外核层水肿可见，空泡样变，颗粒层变薄，细胞稀疏，排列紊乱，内外颗粒层界线不清楚(1×630)（略）
2.5 糖尿病3月葛根素组视网膜变化情况
见图5。
图5 视网膜各层细胞排列整齐，细胞形态正常，各层分界清楚，内颗粒层和外网状层可见少许空泡形成(1×630)（略）
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